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以提高羽毛粉做底物测定角蛋白酶酶活方法的准确性，试验研究了酶的制备方式、测定波长、试剂添加顺序、底物粒度大小、反应体系振荡频率、底物浓度、酶促反应温度、时间和pH值等因素对酶活的影响。结果表明：传统测定方法中使用的底物量并不符合酶促反应动力学中底物要饱和的要求，试剂添加顺序和底物粒度对酶活测定结果也有很大影响；羽毛粉测定角蛋白酶活性的最佳方法为：40w超声波处理30S的发酵液直接离心制取粗酶液，以45mg过40目筛的羽毛粉做底物，按缓冲液（pH值8．81、底物、酶的顺序加入试剂，于45℃水浴中反应，每隔1