幽门螺杆菌HspA—UreB融合蛋白可溶性表达产物的纯化及活性鉴定

• 作 者: 纪晋文 代丽萍 段广才 郗园林
• 机 构: 郑州大学公共卫生学院流行病教研室
• 出 处: 河南医学研究
• 发表日期: 2004年4期
• 关键词: 融合蛋白 幽门螺杆菌 纯化 可溶性表达 ET 含量 动物实验研究 产物 诱导表达 活性鉴定 Helicobacter pylori HspA-UreB fus

目的: 建立一种有效的纯化幽门螺杆菌HspA-UreB融合蛋白可溶性表达产物的方法.方法: 基因工程重组大肠杆菌BL21(pET-HU27)诱导表达产物,超声破碎后收集上清,上清经盐析初步纯化后,在KTA FPLC上运用HiTrap Chelating HP分离纯化,用SDS-PAGE和Bradford法检测目的蛋白的纯度和含量,用Western-blot对纯化后蛋白进行免疫学活性鉴定.结果: 纯化后HspA-UreB融合蛋白的纯度＞90%,含量达0.15 mg/ml,并可以被免疫小鼠血清识别.结论: 建