【摘 要】
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目的:建立高效液相色谱-质谱联用技术分析贝母生物碱的方法,并对川贝母与浙贝母中贝母甲素、贝母乙素含量进行测定与比较。方法:贝母用氨水浸润后,以乙醚-氯仿-乙醇（25:8:2.5）
【机 构】
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湖南师范大学化学生物学及中药分析省部共建教育部重点实验室
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目的:建立高效液相色谱-质谱联用技术分析贝母生物碱的方法,并对川贝母与浙贝母中贝母甲素、贝母乙素含量进行测定与比较。方法:贝母用氨水浸润后,以乙醚-氯仿-乙醇（25:8:2.5）超声提取。将提取物直接进样到电喷雾离子阱质谱检测器进行检测。质谱条件:质谱采用电喷雾正离子模式（ESI+）,扫描范围为 m/z 210～800,贝母甲素、贝母乙素的选择性检测离子分别为 m/z 432和 m/z 430。液相条件:色谱柱:Sphrigel C18柱（200 mm×4.6 mm,5μm）;流动相:乙腈-10 mmol·L-1甲酸铵（pH=8.0,0.03%三乙胺）,梯度洗脱（0～6 min:乙腈30%→45%;6～22 min:乙腈45%;22～30 min:乙睛45%→95%;30～34 min:乙腈30%）;流速:1 mL·min-1;柱温:25℃。结果:川贝母与浙贝母总生物碱提取液的一级质谱图显示,其主要分子离子峰基本相同,相对丰度有较大差异。贝母甲素和贝母乙素的线性范围分别为0.176～44.0μmg·mL-1和0.120～30.0μg·mL-1,相关系数均大于0.999,检测限（LOD）为58.7 ng·mL-1和40.0 ng·mL-1,定量限（LOQ）为17.6 ng·mL-1和12.0 ng·mL-1,方法回收率均大于97%,日内、日间精密度（RSD）分别小于1.3%和2.8%（n=5）。结论:川贝母与浙贝母生物碱提取物的 ESI—MS 图谱有明显差异,可用于贝母药材的鉴别。本方法灵敏度高,专属性强,简便快捷,线性关系良好,适用于贝母中无紫外吸收的异甾体生物碱的检测与分析。
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