【摘 要】
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目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对低浓度过氧化氢(H2 O2)处理的佐剂性关节炎(AA)大鼠成纤维细胞样滑膜细胞(AA-FLS)增殖的影响及机制.方法 SD大鼠分为正常对照组和模型组(均为
【机 构】
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安徽医学高等专科学校形态学实验中心,安徽合肥230061;安徽医科大学形态学实验中心;安徽医科大学临床医学院,安徽合肥230032
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目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对低浓度过氧化氢(H2 O2)处理的佐剂性关节炎(AA)大鼠成纤维细胞样滑膜细胞(AA-FLS)增殖的影响及机制.方法 SD大鼠分为正常对照组和模型组(均为10只),模型组采用足趾皮下注射Freund完全佐剂造模,28 d后处死大鼠.硫代巴比妥酸法检测血清丙二醛(MDA)含量、羟胺法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性,比色法测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,免疫组织化学染色法检测踝关节滑膜组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)、Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)蛋白表达;体外培养和鉴定AA-FLS,CCK-8法检测(0、0.3、0.9、3、10、30、90、180)μmoL/L NAC对5 μmol/L H2O2处理的AA-FLS活力的影响,采用MitoSOX线粒体活性氧荧光探针检测AA-FLS中线粒体活性氧(ROS)含量,Western blot法检测(0、3、10、30) μmol/L NAC对低浓度H2O2处理AA-FLS的Nrf2、Keap1蛋白表达的影响.结果 与正常对照组比较,AA模型大鼠血清MDA水平增加、SOD、GSH-Px水平降低,滑膜组织中Nrf2表达升高、Keap1表达降低;免疫细胞化学染色证实分离培养的细胞是AA-FLS,NAC可浓度依赖性抑制H2 O2处理的AA-FLS增殖,且线粒体ROS含量下降,Nrf2、Keap1蛋白表达降低.结论 NAC可抑制H2 O2处理后的AA-FLS增殖,其机制可能与阻断Nrf2/Keap1通路有关.
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