论文部分内容阅读
摘要：目的 建立同时测定镇痛艾比西帕丸中大黄素和大黄酚含量的方法。方法 采用高效液相色谱法，Pheomenex luna C18色谱柱（250 mm×4.60 mm，5 ?m），柱温35 ℃，流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液（85∶15），检测波长为254 nm，流速1.0 mL/min。结果 大黄素在0.530～5.30 ?g/mL间呈良好的线性关系，r=0.999 4，平均回收率为96.54%，RSD=0.23%；大黄酚在0.535～5.350 ?g/mL间呈良好的线性关系，r=0.999 6，平均回收率为95.38%，RSD=0.22%。结论 本方法具有操作简单、灵敏、准确的优点，分离效果显著，可用于以上2种成分的含量测定和本产品质量控制。
关键词；镇痛艾比西帕丸；高效液相色谱法；大黄素；大黄酚；含量测定
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2012）08-0048-02
镇痛艾比西帕丸收载于《中华人民共和国卫生部药品标准维吾尔药分册》[1]，具有镇痛、镇静、强肝利便的作用，用于头疼发热、感冒、胃肠病患等。镇痛艾比西帕丸是由大黄、曼陀罗子、干姜、阿拉伯胶等药材经过提取加工浓缩制成的水丸。为确保药品质量，我们以方中大黄素和大黄酚作为指标成分，用高效液相色谱法（HPLC）进行含量测定。现报道如下。
1 仪器与试药
Pheomenex luna C18（250 mm×4.60 mm，5 ?m）色谱柱， LC-20AT型泵（日本岛津），SPD-M20型检测器，SIL-20A自动进样器，CTO-10ASVP型柱温箱，AE-240型电子天平，BP-211D型十万分之一电子天平（德国Satroius），KQ-200VDB双频数控超声波清洗器。
镇痛艾比西帕丸（新疆喀什地区维吾尔医医院药厂，批号11040201、11040321、11040329）。大黄素对照品（中国药品生物制品检定所，批号110756-200110），大黄酚对照品（中国药品生物制品检定所，批号110796-200716）；甲醇（色谱纯：美国产；分析纯：天津市富宇精细化工有限公司产）；水为超纯水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
Pheomenex luna C18色谱柱（250 mm×4.60 mm，5 ?m），柱温35 ℃，流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液（85∶15），检测波长为254 nm，流速为1.0 mL/min。进样量为10 ?L。理论塔板数大黄素大于10 000，大黄酚大于15 000[2]。
2.2 对照品溶液的制备
精密取大黄素、大黄酚对照品各10 mg，分别置100 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取大黄素对照品溶液5 mL、大黄酚对照品溶液5 mL置同一100 mL量瓶中加甲醇稀释至刻度，得每1 mL含大黄素5.30 ?g、大黄酚5.35 ?g的混合溶液。冰箱保存备用。
2.3 供试品溶液的制备
取样品适量，研细，精密称定2 g，置100 mL锥形瓶中精密加入50 mL甲醇，称定重量，超声处理30 min（200 W，80 kHz），冷却，补足减失的量，摇匀，用0.45 ?m微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。
2.4 阴性试验
按样品工艺制备缺大黄的阴性对照品，分别吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液，进样10 ?L，结果在阴性对照色谱图中，与大黄素和大黄酚相应位置上没有吸收峰，表明其他成分对大黄素和大黄酚测定无干扰。见图1。
2.5 线性关系考察
精密量取大黄素、大黄酚混合对照溶液1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10 mL置10 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，从中分别取10 ?L，注入液相色谱仪，测定。以进样浓度为横坐标，峰面积为纵坐标进行回归，得标准曲线方程为：大黄素Y=36 515X+1 840.2，r=0.999 4；大黄酚Y=39 761X-342.55， r=0.999 6。大黄素在0.530～5.30 ?g/mL、大黄酚在0.535～5.350 ?g/mL范围内呈良好的线性关系。
2.6 精密度试验
精密量取同一供试品（批号11040201），照供试品溶液方法制备，重复进样5次，每次进样10 ?L，求得大黄素RSD=0.12%，大黄酚RSD=0.16%。
2.7 重复性试验
取同一批号（11040201）样品5份，按样品处理方法平行提取并同法测定2种成分的含量，求得大黄素RSD=1.8%，大黄酚RSD=1.9%。
2.8 稳定性试验
取同一批号（11040201）分别在同日的不同时间（2、4、8、12、24 h）用含量测定方法重复测定5次，计算大黄素和大黄酚的RSD分别为0.63%、0.11%。
2.9 加样回收率试验
采用标准添加法测定回收率。精密称取供试品（批号11040321）2 g，共5份，分别置具塞形瓶中，第1、2份作为空白回收，其余5份分别加入浓度为1.051 mg/mL的大黄素对照品溶液1.0 mL，再分别加入浓度为0.107 0 mg/mL的大黄酚对照品溶液1.0 mL，照“2.3”项下方法制备，并进样10 ?L测定含量。结果大黄素平均回收率为96.54%，RSD=0.23%；大黄酚平均回收率为95.38%，RSD=0.22%。见表1、表2。
3 讨论
本品为复方制剂，药味较多，笔者结合给样品的特点，对供试品的提取条件进行了考察，分别采用超声处理5 min（200 W， 80 kHz）和超声处理30 min（200 W，80 kHz），结果超声处理30 min （200 W，80 kHz）含量最高。本测定结果符合规定，大黄素和大黄酚的含量测定方法阴性对照无干扰，经方法学考察，稳定可行，重复性好，可作为该制剂的质量控制方法。
参考文献：
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准：维吾尔药分册[S].乌鲁木齐：新疆科技卫生出版社，1999：11.
[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：17.
（收稿日期：2011-12-30，编辑：陈静）
关键词；镇痛艾比西帕丸；高效液相色谱法；大黄素；大黄酚；含量测定
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2012）08-0048-02
镇痛艾比西帕丸收载于《中华人民共和国卫生部药品标准维吾尔药分册》[1]，具有镇痛、镇静、强肝利便的作用，用于头疼发热、感冒、胃肠病患等。镇痛艾比西帕丸是由大黄、曼陀罗子、干姜、阿拉伯胶等药材经过提取加工浓缩制成的水丸。为确保药品质量，我们以方中大黄素和大黄酚作为指标成分，用高效液相色谱法（HPLC）进行含量测定。现报道如下。
1 仪器与试药
Pheomenex luna C18（250 mm×4.60 mm，5 ?m）色谱柱， LC-20AT型泵（日本岛津），SPD-M20型检测器，SIL-20A自动进样器，CTO-10ASVP型柱温箱，AE-240型电子天平，BP-211D型十万分之一电子天平（德国Satroius），KQ-200VDB双频数控超声波清洗器。
镇痛艾比西帕丸（新疆喀什地区维吾尔医医院药厂，批号11040201、11040321、11040329）。大黄素对照品（中国药品生物制品检定所，批号110756-200110），大黄酚对照品（中国药品生物制品检定所，批号110796-200716）；甲醇（色谱纯：美国产；分析纯：天津市富宇精细化工有限公司产）；水为超纯水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
Pheomenex luna C18色谱柱（250 mm×4.60 mm，5 ?m），柱温35 ℃，流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液（85∶15），检测波长为254 nm，流速为1.0 mL/min。进样量为10 ?L。理论塔板数大黄素大于10 000，大黄酚大于15 000[2]。
2.2 对照品溶液的制备
精密取大黄素、大黄酚对照品各10 mg，分别置100 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取大黄素对照品溶液5 mL、大黄酚对照品溶液5 mL置同一100 mL量瓶中加甲醇稀释至刻度，得每1 mL含大黄素5.30 ?g、大黄酚5.35 ?g的混合溶液。冰箱保存备用。
2.3 供试品溶液的制备
取样品适量，研细，精密称定2 g，置100 mL锥形瓶中精密加入50 mL甲醇，称定重量，超声处理30 min（200 W，80 kHz），冷却，补足减失的量，摇匀，用0.45 ?m微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。
2.4 阴性试验
按样品工艺制备缺大黄的阴性对照品，分别吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液，进样10 ?L，结果在阴性对照色谱图中，与大黄素和大黄酚相应位置上没有吸收峰，表明其他成分对大黄素和大黄酚测定无干扰。见图1。
2.5 线性关系考察
精密量取大黄素、大黄酚混合对照溶液1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10 mL置10 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，从中分别取10 ?L，注入液相色谱仪，测定。以进样浓度为横坐标，峰面积为纵坐标进行回归，得标准曲线方程为：大黄素Y=36 515X+1 840.2，r=0.999 4；大黄酚Y=39 761X-342.55， r=0.999 6。大黄素在0.530～5.30 ?g/mL、大黄酚在0.535～5.350 ?g/mL范围内呈良好的线性关系。
2.6 精密度试验
精密量取同一供试品（批号11040201），照供试品溶液方法制备，重复进样5次，每次进样10 ?L，求得大黄素RSD=0.12%，大黄酚RSD=0.16%。
2.7 重复性试验
取同一批号（11040201）样品5份，按样品处理方法平行提取并同法测定2种成分的含量，求得大黄素RSD=1.8%，大黄酚RSD=1.9%。
2.8 稳定性试验
取同一批号（11040201）分别在同日的不同时间（2、4、8、12、24 h）用含量测定方法重复测定5次，计算大黄素和大黄酚的RSD分别为0.63%、0.11%。
2.9 加样回收率试验
采用标准添加法测定回收率。精密称取供试品（批号11040321）2 g，共5份，分别置具塞形瓶中，第1、2份作为空白回收，其余5份分别加入浓度为1.051 mg/mL的大黄素对照品溶液1.0 mL，再分别加入浓度为0.107 0 mg/mL的大黄酚对照品溶液1.0 mL，照“2.3”项下方法制备，并进样10 ?L测定含量。结果大黄素平均回收率为96.54%，RSD=0.23%；大黄酚平均回收率为95.38%，RSD=0.22%。见表1、表2。
3 讨论
本品为复方制剂，药味较多，笔者结合给样品的特点，对供试品的提取条件进行了考察，分别采用超声处理5 min（200 W， 80 kHz）和超声处理30 min（200 W，80 kHz），结果超声处理30 min （200 W，80 kHz）含量最高。本测定结果符合规定，大黄素和大黄酚的含量测定方法阴性对照无干扰，经方法学考察，稳定可行，重复性好，可作为该制剂的质量控制方法。
参考文献：
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准：维吾尔药分册[S].乌鲁木齐：新疆科技卫生出版社，1999：11.
[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：17.
（收稿日期：2011-12-30，编辑：陈静）