【摘 要】
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研究目的是构建急性白血病多药耐药相关消减cDNA文库,以用于白血病多药耐药(MDR)相关基因的筛选.采用改良的消减杂交方法建立急性白血病耐药细胞差异表达基因cDNA文库,提取HL
【机 构】
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西安交通大学第二医院血液内科,第四军医大学
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研究目的是构建急性白血病多药耐药相关消减cDNA文库,以用于白血病多药耐药(MDR)相关基因的筛选.采用改良的消减杂交方法建立急性白血病耐药细胞差异表达基因cDNA文库,提取HL-60/VCR与HL-60细胞mRNA,将HL-60/VCR细胞mRNA用Cap-Finder法反转录成cDNA,与以常规反转录的HL-60细胞cDNA为模板,PCR合成生物素标记的扣除探针进行杂交.杂交产物用Sephacryl S-400柱和具有链亲和素作用的磁珠纯化后,得到差异表达cDNA.PCR法特异扩增,进行T-A克隆建成
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