牛乳状瘤病毒13型pEGFP-E5-N1真核表达载体的构建及其在HEK293细胞中的表达

• 作 者: 庞峰 史巧芸 朱华培 徐开莲 赵天靖 李亚颖 彭冬梅 李国华
• 机 构: 海南大学农学院、海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室、海口市动物基因工程重点实验室
• 出 处: 中国畜牧兽医
• 发表日期: 2015年5期
• 关键词: 牛乳状瘤病毒13型(BPV-13) E5 EGFP 融合蛋白 真核表达 bovine papillomavirus type 13 （BPV-13） ES
• 基金项目: 海南大学“中西部”重点学科项目（ZXBJH-XK002）

基于海口市动物基因工程重点实验室获得的牛乳状瘤病毒13型（BPV-13）基因组序列信息（GenBank登录号：KM258443．2），以基因组为模板，扩增E5基因片段，将其连入pEGFP-N1质粒，构建重组质粒pEGFP-E5-N1，测序正确后瞬时转染HEK293细胞，应用荧光显微镜、流式细胞仪、Westernblotting鉴定融合蛋白的表达。结果显示，E5片段大小为135bp；重组质粒pEGFP-E5-N1构建正确；荧光显微镜下观察转染重组质粒pEGFP-E5-N1的HEK293细胞，可见明亮的绿色荧