【摘 要】
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目的:探索蟾毒灵诱导骨肉瘤细胞株凋亡的作用及相关分子机制。方法:利用MTT法检测蟾毒灵处理骨肉瘤细胞株U2OS,U2OS/MTX300(甲氨蝶呤耐药细胞株),SAOS2,IOR/OS9后24,48,72 h
【机 构】
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中山大学附属第一医院骨肿瘤科,华南肿瘤学国家重点实验室中山大学肿瘤防治中心,
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目的:探索蟾毒灵诱导骨肉瘤细胞株凋亡的作用及相关分子机制。方法:利用MTT法检测蟾毒灵处理骨肉瘤细胞株U2OS,U2OS/MTX300(甲氨蝶呤耐药细胞株),SAOS2,IOR/OS9后24,48,72 h的生长抑制作用,通过流式细胞仪检测蟾毒灵处理48 h后上述细胞凋亡率,双向凝胶电泳联合MALDI-TOF/TOF质谱技术筛选蟾毒灵处理U2OS细胞48 h后差异表达的蛋白,Western blot法验证相关蛋白表达。结果:蟾毒灵对四株骨肉瘤细胞株生长抑制作用呈时间及剂量依赖性,蟾毒灵对甲氨蝶呤敏感细胞株U2OS及耐甲氨蝶呤细胞株U2OS/MTX300的72 h IC50分别为(37.43±4.1),(32.24±5.3)nmol·L-1。流式细胞仪检测结果证实蟾毒灵可显著诱导四株骨肉瘤细胞凋亡。蛋白质组学筛选、鉴定出蟾毒灵处理U2OS 48 h后24种差异表达蛋白,进一步Western blot验证发现凋亡相关蛋白中热休克蛋白27表达变化最为显著,并且过表达热休克蛋白27可部分逆转蟾毒灵诱导U2OS及U2OS/MTX300细胞凋亡的作用。结论:蟾毒灵具有显著诱导骨肉瘤凋亡作用,其中热休克蛋白27蛋白水平下调在蟾毒灵诱导的骨肉瘤细胞凋亡中具有重要作用。
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新闻采访是非常重要的一个环节。记者在进行采访时，应注意采访技巧的使用，确保与采访对象之间的沟通．从而完成质量高的新闻报道。