真核表达载体pEGFP-N1-INSRPTK的构建

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目的 构建含人胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶域基因(INSRPTK)的绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-N1-INSRPTK,为进一步研究胰岛素受体抵抗在多囊卵巢综合症中的作用打下基础.方法 应用RT-PCR方法从人胚肾293细胞扩增出两端带有HindIII和EcoRI酶切位点的INSRPTK cDNA编码片段,经回收、纯化、酶切后,依次连接到质粒pMD18-T和pEGFP-N1上.结果 酶切及测序表明:重组质粒PEGFP-N1含有INSRPTK片段,方向及序列正确.结论 成功构建了人真核表达载体pEGFP-N1
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