【摘 要】
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R-藻红蛋白的提取是其分离纯化的重要前提.因此,选择适合的提取方法是较为关键的步骤.以坛紫菜藻为材料,分别采用反复冻融法、液氮研磨法、细胞溶胀法、低浓度CaC l2提取法、
【机 构】
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哈尔滨工业大学市政环境工程学院,上海交通大学环境科学与工程学院
【基金项目】
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国家自然科学基金(50808052);哈尔滨市科技创新人才研究专项资金(2010RFLXS008)
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R-藻红蛋白的提取是其分离纯化的重要前提.因此,选择适合的提取方法是较为关键的步骤.以坛紫菜藻为材料,分别采用反复冻融法、液氮研磨法、细胞溶胀法、低浓度CaC l2提取法、SDS溶液提取法、纤维素酶提取法和超声波破碎法提取R-藻红蛋白,以期确定最佳的提取方法.研究结果表明:在反复冻融法中,以磷酸盐缓冲液为提取液,冷冻2 h,反复冻融6次,提取效果最佳(纯度0.631 6),且低温有利于保持蛋白活性;在低浓度CaC l2提取法中,0.05 mol/L CaC l2提取效果较好(纯度0.547 0),但会增加后续分离过程的难度且提取时间较长;在超声波破碎法中,以400 W功率超声20 m in,提取效果较好(纯度0.511 2)且时间短;其他提取方法虽然提取效果一般,但也有各自的优势,可依据实验要求选择合适的提取方法.
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