【摘 要】
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为探讨三结构域重组纤连蛋白(FN)在肿瘤治疗中的作用,构建了两个三结构域重组FN表达质粒pF94-62和pF94-82,它们分别编码两个重组多肽:CH62(FN的Pro 1239-Ser 1515经 Met 和 A
【机 构】
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武汉市卫生防疫站,同济医科大学医学分子生物学研究室
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为探讨三结构域重组纤连蛋白(FN)在肿瘤治疗中的作用,构建了两个三结构域重组FN表达质粒pF94-62和pF94-82,它们分别编码两个重组多肽:CH62(FN的Pro 1239-Ser 1515经 Met 和 Ala 1690-Val 2049 相连)和CH82(从CH62中删除了HepⅡC端和Cell Ⅱ结构域N端的Pro 1953-Glu 1978).含表达质粒pF94-82的工程菌经17℃培养,GH82得到表达,表达产物主要以包涵体形式存在,经尿素变性与复性处理后,通过肝素-琼脂糖亲和层析纯化,纯化产物进行细胞粘附试验.CH62在大肠杆菌中的表达效率很低(5%),而CH82的表达效率很高(21%),提示FN分子中Cell Ⅱ结构域的 N 端顺序是影响三结构域重组多肽在大肠杆菌中表达倒丶峁?纯化的CH82具有结合肝素和结合细胞的功能,且结合细胞的能力比双结构域FN更强.CH82的制备为进一步研究具有更强的抑制肿瘤转移作用及免疫调节作用的基因工程制品奠定了基础.
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