【摘 要】
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目的 探讨匹诺塞林(PIN)对脂多糖(LPS)诱导的心肌细胞(H9C2)氧化应激和细胞凋亡的影响,分析其机制是否与调控miR-486-5p表达有关.方法 采用5 mg/L的LPS处理H9C2细胞6 h建立细胞损伤模型.将H9C2细胞分为对照(Con)组、LPS组、LPS+PIN-低剂量(L)组、LPS+PIN-中剂量(M)组、LPS+PIN-高剂量(H)组、LPS+anti-miR-NC组、LPS+anti-miR-486-5p组、LPS+PIN+miR-NC组、LPS+PIN+miR-486-5p组.流
【机 构】
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100028 北京市,应急总医院心内科;100028 北京市,应急总医院呼吸内科
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目的 探讨匹诺塞林(PIN)对脂多糖(LPS)诱导的心肌细胞(H9C2)氧化应激和细胞凋亡的影响,分析其机制是否与调控miR-486-5p表达有关.方法 采用5 mg/L的LPS处理H9C2细胞6 h建立细胞损伤模型.将H9C2细胞分为对照(Con)组、LPS组、LPS+PIN-低剂量(L)组、LPS+PIN-中剂量(M)组、LPS+PIN-高剂量(H)组、LPS+anti-miR-NC组、LPS+anti-miR-486-5p组、LPS+PIN+miR-NC组、LPS+PIN+miR-486-5p组.流式细胞术检测H9C2凋亡率.蛋白质印迹法检测cleaved-caspase3和cleaved-caspase9蛋白表达.检测细胞中丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.实时定量PCR分析miR-486-5p表达水平.结果 与Con组比较,LPS组细胞凋亡率、cleaved-caspase3和cleaved-caspase9蛋白表达量、MDA水平、miR-486-5p表达量显著升高(P<0.05),SOD和GSH-Px活性显著降低(P<0.05).与LPS组比较,LPS+PIN-L组、LPS+PIN-M组、LPS+PIN-H组细胞凋亡率、cleaved-caspase3和cleaved-caspase9蛋白表达量、MDA水平、miR-486-5p表达量显著降低(P<0.05),SOD和GSH-Px活性显著升高(P<0.05).与LPS+anti-miR-NC组比较,LPS+anti-miR-486-5p组细胞凋亡率、cleaved-caspase3和cleaved-caspase9蛋白表达量、MDA水平显著降低(P<0.05),SOD和GSH-Px活性显著升高(P<0.05).与LPS+PIN+miR-NC组比较,LPS+PIN+miR-486-5p组细胞凋亡率、cleaved-caspase3和cleaved-caspase9蛋白表达量、MDA水平显著升高(P<0.05),SOD和GSH-Px活性显著降低(P<0.05).结论 匹诺塞林可抑制LPS诱导的心肌细胞氧化应激损伤和凋亡,其机制与抑制miR-486-5p表达有关.
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