【摘 要】
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利用千酪乳杆菌(Lactobacillus casei)作为抗原传递系统来刺激机体产生黏膜免疫反应,从而研制有效的黏膜疫苗预防产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)的感染.用PCR方法扩增ETEC K99基因
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利用千酪乳杆菌(Lactobacillus casei)作为抗原传递系统来刺激机体产生黏膜免疫反应,从而研制有效的黏膜疫苗预防产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)的感染.用PCR方法扩增ETEC K99基因,克隆到L.casei细胞表面表达载体pLA中,构建了重组表达载体pLA.K99,并将其电转化至L.casei中,在MRS培养基中培养后,经SDS-PAGE、western blot检测目的蛋白的表达,间接免疫荧光分析及流式细胞术检测外源蛋白展示到菌体表面.将重组菌及空质粒菌株分别口服接种SPF级BALB/c小鼠.采集血液样品测定小鼠产生抗K99的特异性IgG,收集小鼠肺部、肠道、阴道冲洗液及粪便样品测定小鼠产生的抗K99的特异性sIgA,并对小鼠进行攻毒保护性试验,免疫组保护率在83%以上,对照组则全部死亡.
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