第三方骨髓问充质干细胞诱导同种异体移植受体免疫耐受机制的研究

• 作 者: 齐丙迪 孟宝玺 杨阳 刘蓓 李翅翅 夏炜 郭树忠 张晨
• 机 构: 遵义医学院,遵义563003,遵义医学院,遵义563003,医大学西京医院全军整形外科研究所,医大学西京医院全军整形外科研究所,医大学西京医院全军整形外科研究所,医大学西京医院全军整形外科研究所,医大
• 出 处: 中华整形外科杂志
• 发表日期: 2011年27期

目的 初步研究第三方骨髓间充质于细胞（bone marrow-derived mesenchymal stemcells，BMSCs）诱导同种异体移植受体免疫耐受的作用机制。方法40只雌性C57BL／6小鼠作为供体，40只雄性BALB／C小鼠作为受体，建立稳定的同种异体皮肤移植模型，BMSCs取自sD大鼠骨髓。将40只BALB／C小鼠随机分为4组，每组10只。①空白对照组：只进行皮肤移植，未给予其他治疗；②环磷酰胺组（CP组）：大剂量环磷酰胺（cyclophosphamide，CP）腹腔注射，200mg／kg，连用2d（q．d．）；③单纯给予SD．BMSCs移植组（SD-BMSCs组）：移植当天自受体小鼠尾静脉输注2×10。个SD．BMSCs；④细胞药物联合应用组（CP＋SD-BMSCs组）：大剂量CP腹腔注射，200mg／kg，连用2d（q．d．），并于移植当天自受体小鼠尾静脉输注2×10。个SD-BMSCs。检测指标包括：移植皮片存活情况；SD大鼠BMSCs表面抗原CD29、CD34、CD45和CD90鉴定；流式细胞仪检测受体脾脏调节性T细胞（CD4^＋、CD25^＋、Foxp3^＋、Treg细胞）的比例；ELISA检测受体外周血TGF-p、IL-10、IFN-1的含量；异基因T淋巴细胞与经60^Co照射的不同来源BMSCs共培养后，MTT法测定异基因T淋巴细胞增殖的情况。结果CP＋SD-BMSCs组皮肤移植物存活时间为（15．7±1．4）d，空白对照组为（6．1±1．1）d，CP组为（12．3±1．5）d，SD-BMSCs组为（12．6±1．8）d，CP＋SD—BMSCs组皮肤移植物存活时间明显比后3组延长（P〈0．05）。全骨髓贴壁培养的BMSCs表面抗原鉴定：CD29^＋、CD44^＋分别为99．7％和96．7％，CD34-、CD45-分别为1．6％和1．3％。流式细胞仪检测Treg含量SD-BMSCs组和CP＋SD-BMSCs组明显高于空白对照组和CP组（P〈0．05）；ELISA检测受体外周血SD-BMSCs组和cP组TGF—B和IL-10明显高于空白对照组，SD—BMSCs和cP组IFN-γ则明显低于空白对照组（P〈0．05）；共培养结果显示：来源于C57小鼠和sD大鼠的BMSCs可以明显抑制T淋巴细胞的增殖反应（P〈0．05），而上述两组组间比较差异则无统计学意义（P〉0．05）。结论第三方BMSCs诱导同种异体移植免疫耐受作用可能与诱导受体Treg细胞增殖和促进免疫耐受因子的表达，抑制免疫排斥因子的表达有关。