稳定表达小鼠白介素12的间充质干细胞株的筛选与鉴定

• 作 者: 徐健蓉 李红霞 王国庆 杜小波 魏于全 赵菊梅
• 机 构: 四川大学生命科学学院,四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室,西南科技大学
• 出 处: 四川大学学报(医学版)
• 发表日期: 2009年4期
• 关键词: 白细胞介素12 间充质干细胞 慢病毒载体 Interleukin-12 Mesenchymal stem cells （MSCs） Lentivirus vec

目的筛选获得慢病毒介导的分泌表达小鼠白介素12（mIL-12）的间充质干细胞株。方法采用PCR反应从pORF-mIL-12中扩增得到mIL-12基因的完整序列，克隆人pENTR^TM11质粒，构建含小鼠IL-12基因的重组质粒pENTR-mIL-12，与pLenti6／V5-Dest质粒进行细胞外重组，得到pLenti6／V5-mIL-12质粒，经PCR、多酶切鉴定正确后送Invitrogen公司上海分公司测序；用293FT细胞进行病毒包装，得到具有感染性的病毒；分离小鼠间充质于细胞，用杀稻瘟素筛选Len