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[摘要] 目的 探讨Notch1在小细胞肺癌多药耐药中的作用。 方法 首先通过QRT—PCR和Western—blot从基因和蛋白水平检测小细胞肺癌敏感细胞株（H69）和耐药细胞株（H69AR）中Notch1的差异表达；应用siRNA抑制耐药细胞株H69AR中的Notch1的表达，通过CCK8检测细胞对各种化疗（ADM，DDP，VP—16）的敏感性，流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化。 结果 Notch1在H69AR中的表达明显高于H69，抑制耐药细胞株中Notch1的表达能够增加细胞对化疗药物的敏感性，促进细胞的凋亡。 结论 Notch1可能参与了调节小细胞肺癌对多药耐药性。全文查看链接
将合成的SiRNA转染入H69AR细胞，转染前 24 h将细胞按5×105个/mL密度接种于6孔板，转染时细胞融合度为70%左右，将500 μL Opti—MEM或者无血清培养基稀释 3 μL LipofectamineTM 2000，轻轻吹吸 3～5 次混匀，室温下静置 5 min；将3 μL干扰片段稀释于500 μL Opti—MEM或者无血清培养基中，轻轻吹吸3～5次混匀；混合转染试剂和质粒稀释液，轻轻吹吸3～5次混匀，室温下静置 20 min；转染复合物加入到 6孔细胞板中，1mL/孔，前后轻摇细胞板混合均匀。细胞板置于 37℃、5% CO2培养箱中培养 4～6 hrs 后换新鲜培养基。转染后24 h检测基因表达的变化，48 h后检测蛋白的表达。全文查看链接
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