云杉叶疫病根球壳孢菌的分子检测

• 作 者: 许秀兰 张岩 杨春琳 袁川 刘应高
• 机 构: 四川农业大学林学院,西藏林业调查规划研究院,四川省广安市林业局
• 出 处: 湖南农业大学学报(自然科学版)
• 发表日期: 2016年1期
• 关键词: 云杉叶疫病 根球壳孢菌 分子检测 spruce needle blight Rhizosphaera kalkhoffii molecular detectio

从四川二郎山人工云杉林分离得到云杉叶疫病病原菌,采用真菌通用引物ITS1和ITS4扩增得到的序列与NCBI中的根球壳孢菌（Rhizosphaera kalkhoffi）相似度达99%。比较分析了NCBI及四川二郎山分离到的根球壳孢菌ITS区序列,采用软件primer5.0设计20个引物。通过对32株菌株DNA进行PCR扩增及产物测序,筛选得到3个特异性引物对ZYZ6、ZYZ7、ZYZ8。改变DNA模板浓度进行扩增检测,在25μL PCR反应体系中,引物对ZYZ6F/ZYZ6R检测灵敏度最高,可达到0.1