核心组蛋白的融合表达和纯化

• 作 者: 曹佳 丁丽华 范忠义 程龙 蒋凯 徐晓洁 韩永健 徐承水 叶
• 机 构: 军事医学科学院生物工程研究所,曲阜师范大学生命科学学院
• 出 处: 生物技术通讯
• 发表日期: 2011年4期
• 关键词: 组蛋白 克隆 表达 融合蛋白 nucleosmal histones cloning expression fusion protein
• 基金项目: 国家自然科学基金（30870499 31071174 81072173）

目的：克隆核心组蛋白H2A、H2B、H3和H4的基因,表达并纯化组蛋白与谷胱甘肽S-转移酶（GST）的融合蛋白。方法：用PCR方法从乳腺文库中扩增核心组蛋白H2A、H2B、H3和H4的编码序列,分别将其以正确相位与pGEX-KG载体中的GST编码序列融合,得到重组质粒pGST-H2A、pGST-H2B、pGST-H3和pGST-H4,分别转化大肠杆菌BL21,表达融合蛋白GST-H2A、GST-H2B、GST-H3和GST-H4;用谷胱甘肽-Sepharose 4B亲和纯化融合蛋白;用Western印迹检