【摘 要】
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目的:探讨PI3K/Akt信号通路对人肝细胞癌Huh-7细胞乙酰化及糖酵解的影响及机制.方法:体外培养Huh-7细胞株,应用不同浓度的PI3K/Akt抑制剂LY294002与mTOR抑制剂雷帕霉素分别进
【机 构】
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南京医科大学第一临床医学院,江苏 南京 210029;南京医科大学病理系,江苏 南京210029
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目的:探讨PI3K/Akt信号通路对人肝细胞癌Huh-7细胞乙酰化及糖酵解的影响及机制.方法:体外培养Huh-7细胞株,应用不同浓度的PI3K/Akt抑制剂LY294002与mTOR抑制剂雷帕霉素分别进行干预;乳酸试剂盒法检测乳酸水平;Westernblot法检测肿瘤细胞中三磷酸腺苷柠檬酸盐裂解酶(adenosine triphosphate-citrate lyase,ACL)表达水平与乙酰化修饰水平;WST法检测细胞增殖水平.结果:①LY294002干预组的乳酸水平低于DMSO对照组,下降66.15％,细胞内ACL的表达水平下降20.84％,乙酰化水平在多位点表达水平下降(P＜ 0.01,n=3);②雷帕霉素干预组的乳酸水平低于DMSO对照组,下降90.16％,细胞内ACL的表达水平下降64.16％,乙酰化水平在多个位点表现出不同水平的下降(P＜ 0.01,n=3);③以DMSO干预作为对照,20 mmol/L的LY294002和20 μg/L的雷帕霉素分别作用24 h后,对Huh-7细胞的增殖抑制率分别为24.78％和20.67％(P＜ 0.01,n=3).结论:Huh-7细胞中活化的PI3K/Akt/mTOR信号通路能通过提高ACL的表达,上调细胞内乙酰化的修饰水平,从而增加肿瘤细胞的糖酵解,促进肿瘤细胞的生长.
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