目的 探讨p53凋亡刺激蛋白2（apoptosis stimulating protein 2 of p53，ASPP2）对饥饿诱导的大肠癌HCTll6p53-/-（p53缺失）细胞自噬和凋亡的影响。方法实验分3组：（1）绿色荧光蛋白腺病毒（green fluorescent protein adenovirus，rAd-GFP）感染组（对照组）；（2）自噬抑制剂LY294002处理组；（3）ASPP2腺病毒（ASPP2adenovirus，rAd-ASPP2）感染组。无血清培养基分别培养0、24、48h诱导细胞自噬和凋亡。利用calcein／PI吸收试验观察各组细胞凋亡水平。细胞转染红色荧光蛋白自噬质粒Lc3（cerisefluorescentproteinautophagyplasmidLc3，CFP-Lc3），在荧光显微镜下观察各组细胞自噬水平。结果rAd—GFP感染组饥饿24h细胞的自噬水平升高显著（0h：1．04±0．24；24h：12．17±0．86，P〈0．05），而凋亡水平改变差异无统计学意义（0h：2．01％4-0．06％；24h：3．23％±0．34％，P〉0．05）；饥饿时间延长至48h，自噬水平（0h：1．044-0．24；48h：21．094-3．32）和凋亡水平（0h：2．01％4-0．06％；48h：30．20％-I-3．18％）升高，差异均具有统计学意义（均P〈0．05）。使用LY294002抑制细胞自噬，饥饿24h细胞凋亡显著增多（rAd—GFP组：3．23％±0．34％；LY294002组：15．68％±1．24％，P〈0．01），而饥饿48h凋亡显著减少（rAd—GFP组：30．20％±3．18％；LY294002组：25．44％4-3．01％，P〈0．05）。rAd—ASPP2感染组饥饿24h自噬显著降低（rAd．GFP组：12．17±0．86；ASPP2组：1．454-0．45，P〈0．01），而凋亡显著升高（rAd—GFP组：3．23％±0．34％；ASPP2组：10．45％±0．81％，P〈0．05）；饥饿48h自噬（rAd—GFP组：21．09±3．32；ASPP2组：29．93±3．48）和凋亡（rAd．GFP组：30．20％±3．18％；ASPP2组：36．72％±2．74％）水平均显著升高（均P〈0．05）。结论ASPP2通过对自噬的双向调节促进饥饿诱导的大肠癌HCTl16p53。一细胞凋亡。
p53凋亡刺激蛋白2对饥饿诱导的大肠癌HCTll6p53-／-细胞自噬和凋亡的影响
【摘 要】
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目的 探讨p53凋亡刺激蛋白2（apoptosis stimulating protein 2 of p53，ASPP2）对饥饿诱导的大肠癌HCTll6p53-/-（p53缺失）细胞自噬和凋亡的影响。方法实验分3组：（1）绿色荧光蛋白腺病毒（green fluorescent protein adenovirus，rAd-GFP）感染组（对照组）；（2）自噬抑制剂LY294002处理组；（3）AS
【机 构】
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山东省肿瘤医院外科四病区,济南250117,首都医科大学附属北京佑安医院感染科,首都医科大学附属北京市肝病研究所,首都医科大学附属北京佑安医院感染科,山东省肿瘤医院外科四病区,济南250117
【出 处】
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中华普通外科杂志
【发表日期】
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2013年28期
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