【摘 要】
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目的 观察传统型蛋白激酶C(cPKCs)在胃癌耐药细胞系SGC790 1/VCR1.0、耐药亚系SGC790 1/VCR0 .3,SGC790 1/VCR0 .7及药敏细胞系SGC790 1表达及活性的变化 ,以及对细胞内药物
【机 构】
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第四军医大学西京医院全军消化病研究所,第四军医大学学员旅六大队
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目的 观察传统型蛋白激酶C(cPKCs)在胃癌耐药细胞系SGC790 1/VCR1.0、耐药亚系SGC790 1/VCR0 .3,SGC790 1/VCR0 .7及药敏细胞系SGC790 1表达及活性的变化 ,以及对细胞内药物浓度的影响 .方法 用免疫荧光化学及蛋白印迹方法观察传统型蛋白激酶C在胃癌耐药细胞系及药敏细胞系的表达 ;竞争蛋白结合法测定PKC的活性 ;应用流式细胞仪观察细胞内药物浓度的变化 .结果 PKCα,PKCβⅠ ,PKCβⅡ 及PKCγ在胃癌耐药细胞系及药敏细胞系均有表达 ,PKCα在耐药细胞表达呈强阳性 ,在药敏细胞表达呈阳性 ;PKCβⅠ 及PKCβⅡ 在耐药细胞及药敏细胞表达均为阳性 ;PKCγ在耐药细胞及药敏细胞表达均为强阳性 .免疫蛋白印迹实验证实 ,随耐药指数的增加 ,PKCα表达呈逐渐增高的趋势 ,薄层扫描蛋白印迹带的吸光度 (A)分别为 95 84.17,942 1.0 6 ,85 34 .6 4,80 88.79,而PKCβⅠ ,PKCβⅡ 及PKCγ在耐药细胞系、耐药亚系及其药敏细胞系表达无明显变化 .PKC活性检测结果提示 ,随耐药指数的增加 ,PKC活性呈逐渐增高的趋势 ,以细胞质及细胞核的PKC活性增高为主 .结论 传统型蛋白激酶C在维持胃癌耐药细胞系SGC790 1/VCR的多药耐药中起重要作用且具有同工酶特异性
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