【摘 要】
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目的改进小片段HRM方法并应用于人类RAGE基因SNP位点检测。方法将原来一步式闭管操作的小片段HRM方法改成两步式开管操作;改进温度内标使用方法以增加该方法的经济性。利用改
【机 构】
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广东医学院附属医院临床医学研究中心,广东医学院附属医院消化内科研究室,广东医学院附属医院病理诊断与研究中心,广东医学院附属医院干细胞研发与临床转化中心
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目的改进小片段HRM方法并应用于人类RAGE基因SNP位点检测。方法将原来一步式闭管操作的小片段HRM方法改成两步式开管操作;改进温度内标使用方法以增加该方法的经济性。利用改进的小片段HRM方法对89例人类RAGE基因内SNP位点进行分型检测;利用Sanger测序方法检测评价改进后HRM小片段方法的准确性。结果将小片段HRM方法改进为两步式,扩大应用范围的同时大大降低运行成本;成功对人类RAGE基因的3个SNP位点进行分型检测;Sanger验证改进后的小片段HRM方法具有良好的准确性。结论改进后的小片段HRM方法可经济、准确地检测SNP位点,是一种适合中、高通量SNP位点检测的方法,具有良好的临床应用潜力。获得能够准确区分RAGE基因3个SNPs标记的HRM引物,可用于进一步研究RAGE在验证相关疾病中的作用机制。
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