论文部分内容阅读
目的
探讨小干扰RNA(siRNA)沉默畸胎瘤衍生生长因子-1(TDGF-1)基因对人前列腺癌细胞PC3迁移的影响及机制。
方法通过Silintfect分别将阴性对照siRNA、TDGF-1 siRNA转染到PC3细胞，空白(Blank)组无需特殊处理。分别纯化各组所提取的总RNA和蛋白；运用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测TDGF-1 mRNA和蛋白表达变化、Western blot法测上皮-间充质转化(EMT)相关标志物蛋白：波形蛋白(Vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)的表达变化。Transwell观察细胞迁移能力的变化。
结果与阴性对照(0.988±0.011)、空白组(1.000±0.000)比较，实验干扰组(0.250±0.046)的TDGF-1 mRNA相对表达量明显降低(P＝0.007，P＝0.006)。干扰组的TDGF-1、N-cadherin、Vimentin蛋白的表达量较阴性对照、空白组明显降低，E-cadherin蛋白则显著升高。Transwell实验结果示实验组[(84.667±7.572)个]细胞的迁移能力较空白组[(174.333±10.017)个]、阴性对照组[(168.333±4.041)个]明显减弱(P＝0.022，P＝0.025)。
结论下调TDGF-1基因的表达能够减弱细胞的迁移能力，其机制可能与EMT有关。