猪O型口蹄疫病毒强弱毒株VP1基因的克隆与序列分析

• 作 者: 娄高明 杜伟贤 魏平华 宋长绪 杨傲冰 周秀蓉 张春红 谢明
• 出 处: 中国预防兽医学报
• 发表日期: 2001年5期
• 关键词: O型口蹄疫病毒 VP1基因 基因克隆 序列测定 猪 强毒株 弱毒株 Foot_and_mouth disease virus VP1 gene Cloning
• 基金项目: 广东省自然科学基金重大项目 (No96 30 0 7) ,,广东省科技攻关项目 (No .99B0 5 6 0 1G) ,,广东省农科院院长基金项目 (No96_基金_10 )

本研究根据口蹄疫病毒(FMDV)VP1基因的序列,设计并合成了1对用于扩增整个VP1基因的引物(5P、P6).从细胞培养液或组织中提取总RNA,通过PT-PCR扩增,从F29株、O3I3株和T509株中均获得了1条约740bp的DNA电泳带.将PCR产物双酶切后电泳回收,插入到相应双酶切的pUC18质粒中,获得了重组质粒.通过PCR鉴定,证明重组质粒pUCVP1/F29、pUCVP1/O313、pUCVP1/T509均插入了VP1基因.对上述3个重组质粒进行测序后分析,F29强毒株与O3I3、T509弱毒