水貂IFN-α、IFN-β及IFN-γ mRNA荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

• 作 者: 王洋 胡博 张海玲 鲁荣光 吕爽 刘昊 孙彦刚 马凡舒 赵建
• 机 构: 中国农业科学院特产研究所经济动物疫病研究室,吉林农业大学动物科学技术学院
• 出 处: 动物医学进展
• 发表日期: 2015年11期
• 关键词: SYBR GreenⅠ 实时荧光定量PCR 水貂 Α干扰素 Β干扰素 γ干扰素 SYBR GreenⅠ real-time PCR mink IFN-α
• 基金项目: 吉林省科技发展计划项目（20130206026NY,20140520172JH）, 吉林市杰出青年项目（2013625018）, 吉林市科技发展计划（2013222014）

为采用SYBR GreenⅠ染料建立检测水貂IFN-α、IFN-β和IFN-γmRNA荧光定量RT-PCR检测方法,根据GenBank中登录的MiIFN-α和MiIFN-β、MiIFN-γ和3-磷酸甘油脱氢酶（GAPDH）基因序列,分别设计合成特异性引物,通过RT-PCR扩增MiIFN-α、MiIFN-β、MiIFN-γ和MiGAPDH的基因片段,构建到pMD18-T载体中制备质粒标准品,建立了相应基因mRNA的荧光定量RT-PCR检测方法并建立标准曲线。结果表明,MiGAPDH、MiIFN-α和MiIF