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摘要：目的 观察广痛消泡沫气雾剂对小鼠的镇痛作用及对大鼠创面的促愈合作用。方法 扭体实验将小鼠随机分为模型组、正常组、强痛定组和广痛消大、中、小剂量组，先予腹腔注射药物，0.5 h后再次腹腔注射0.6%冰醋酸10 mL/kg，观察末次给药后0.5 h内小鼠扭体次数、扭体潜伏时和扭体反应抑制率。热板实验将雌性小鼠随机分为盐水组、强痛定组和广痛消大、中、小剂量组，给药前1 h及给药后0.5 h后测定痛阈值。愈合实验将大鼠分为广痛消组、盐水组和康复新组，用打孔器在大鼠背部制造创面，每日换药1次，至创面完全愈合，观察第3、7、14日创面愈合率及总愈合时间。结果 广痛消大、中、小剂量组扭体次数均明显少于模型组和强痛定组（P<0.05），扭体潜伏时均长于模型组和强痛定组（P<0.05）；广痛消大、中剂量组痛阈提高百分率均大于盐水组（P<0.05），与强痛定组比较差异无统计学意义（P>0.05）。广痛消组创面愈合率第14日高于盐水组（P<0.05），与康复新组比较差异无统计学意义（P>0.05）；愈合时间较盐水组短（P<0.05），与康复新组比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论 广痛消泡沫气雾剂对小鼠有较好的镇痛作用，对大鼠创面有较强的促愈合作用，剂量越大，疗效越好。
关键词：广痛消泡沫气雾剂；扭体法；热板法；促进愈合；小鼠；大鼠
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2012.03.013
中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2012）03-0033-03
广痛消泡沫气雾剂为肛门外用止痛剂，止痛效果好、起效快、安全可靠。泡沫气雾剂具有黏弹性、持续缓慢渗透性和柔软舒适感[1]，是软膏、栓剂、灌肠剂等无法相比的。在相关药效学实验[2]基础上，我们对其制药工艺进行了改进，并对药效学实验进行重新设计，观察改进后的广痛消泡沫气雾剂的疗效。
1 实验材料
1.1 动物
清洁级ICR小鼠，体质量（20±2）g；清洁级SD大鼠，体质量（250±20）g，中国医学科学院动物中心提供，许可证编号：SCXK（京）2009-0007。购进后适应性喂养3 d。实验场所为北京中医药大学东直门医院实验室，环境温度（20±2）℃，相对湿度20%～30%。
1.2 試剂及药物
冰醋酸（北京化工厂，批号20090505）、强痛定注射液（天津金耀氨基酸有限公司，批号0808271）、水合氯醛（国药集团化学试剂有限公司，批号20081027）、乙醚（北京化工厂，批号20090707）均为分析纯；含1.055 6 g原药材/mL广痛消原液（北京中医药大学中药学院提供）、康复新液（四川攀西药业有限公司，批号101022）。用去离子水将强痛定和冰醋酸分别稀释成0.25%和0.6%；用去离子水配制10%水合氯醛。
1.3 仪器
恒温水浴箱（上海金工机电设备有限公司），电子天平（深圳怡华新电子有限公司），游标卡尺（上海量具刃具厂）， Panasonic FH1牌摄相机（松下电器产业株式会社），打孔器。
2 实验方法
2.1 镇痛作用研究
2.1.1 扭体法 取ICR小鼠60只，雌雄各半，随机分为正常组、模型组、强痛定组及广痛消大、中、小剂量组，每组10只。各给药组先予腹腔注射药物，0.5 h后再次腹腔注射0.6%冰醋酸10 mL/kg；正常组小鼠先予腹腔注射生理盐水，0.5 h后再腹腔注射生理盐水（与冰醋酸等量）；模型组先予腹腔注射生理盐水，0.5 h后再腹腔注射冰醋酸。观察末次给药后0.5 h内小鼠扭体（腹部凹陷，躯干后腿伸直，臀部高起）次数、扭体潜伏时间（给药后至出现第1次扭体的时间间隔，0.5 h内未扭体者，其潜伏时按0.5 h计算）。扭体反应抑制率（%）=（模型组扭体数均值-实验组扭体数均值）/模型组扭体数均值×100%。
2.1.2 热板法 参考文献[3]。恒温水浴箱调至（55.0±0.5）℃，500 mL烧杯的底部接触水面，加热后做热刺激，秒表记录雌性小鼠自投入烧杯至出现舔后足的时间，作为该鼠的痛阈值，小于10 s或大于30 s或跳跃者均弃之不用。筛选合格雌性小鼠50只，随机分成强痛定组、盐水组及广痛消大、中、小剂量组，每组10只。给药前1 h、给药后0.5 h后分别测定痛阈值，超过60 s无反应者，其痛阈值按60 s计算。痛阈提高百分率（%）=（给药后痛阈-给药前痛阈）/给药前痛阈×100%。
2.2 促进愈合疗效实验
2.2.1 分组、造模与给药 取SD大鼠36只，雌雄各半，随机分为广痛消组、盐水组、康复新组。第1日10%水合氯醛腹腔注射麻醉（3.3 mL/kg）后，在大鼠两耳根部连线后4.5 cm背部正中央处，将鼠毛剔净，用打孔器造一面积约20 mm×11 mm创面，深达筋膜，换药时用1 mL注射器将药液均匀喷洒在创面上，每日1次。每只大鼠单笼喂养，以免互相抓伤；每2 d更换一次垫料，以免污物感染伤口。
2.2.2 观察指标 观察第1、3、7、14日创面面积并计算愈合率：以游标卡尺做参照，相机拍摄创面。拍摄时采用麻醉方法使大鼠处于放松状态，以免牵拉伤口（造模当日水合氯醛麻醉，第3、7、14日乙醚吸入麻醉）；创面、卡尺位于同一平面；相机垂直拍摄。采用Image Pro Plus软件计算创面面积。创面愈合率（%）=（第1日创面面积-观察当日创面面积）/第1日创面面积×100%。愈合时间：完全愈合以创面完全上皮化为准。
3 统计学方法
采用SPSS12.0统计软件处理。所有数据以—x±s表示，采用方差分析，各组与空白组和阳性对照组的比较采用Dunnet-t检验。广痛消各剂量组间两两比较采用LSD-t检验；若方差不齐，则采用近似t检验。P<0.05为差异有统计学意义。 4 结果
4.1 广痛消泡沫气雾剂对小鼠的镇痛作用（见表1、表2）
4.2 广痛消泡沫气雾剂对大鼠创面的促愈合作用
第1日创面面积比较差异无统计学意义（P=0.642 6），显示3组基线资料均衡。第3、7日3组愈合率差异无统计学意义（P=0.953 6，P=0.799 0）。愈合时间及第14日3组愈合率差异有统计学意义（P=0.024 5，P=0.000 1），广痛消促进愈合作用明显，疗效与康复新液相当。见表3。
5 讨论
疼痛是伴随真实或潜在性组织损伤或根据这种损伤所描述的一种不愉快的感觉和情感体验[4]，其病理实质是伤害性刺激引起细胞损伤，使细胞内的化学物质释放出来，兴奋伤害感受器，通过传入神经将这种刺激转化为神经冲动，传入中枢神经而产生痛感觉和痛反应。目前常用的验证药物止痛疗效的方法有热板法和扭体法。扭体法是通过化学刺激物质引起深部炎性疼痛，使小鼠出现扭体反应，能反映药物对外周性疼痛的止痛效果[5]。热板法中动物舔后足被认为是经脊髓上中枢整合后的行为，反映药物的镇痛作用是否具有一定的中枢抑制作用。扭体实验中，广痛消大、中、小剂量组能延长小鼠的扭体潜伏时间，减少扭体次数，说明广痛消具有较强的外周镇痛作用；热板法实验中，广痛消大、中剂量组能显著提高小鼠的痛阈，表明广痛消具有明显的中枢镇痛作用。可见，广痛消的镇痛特点表现为外周镇痛和中枢镇痛作用的综合效应。
广痛消泡沫气雾剂由延胡索、白芍等中药提取有效成分制成。延胡索能活血利气止痛，白芍能柔肝缓急止痛，临床上常用于治疗各种疼痛性疾病。药理研究表明，延胡索主要止痛作用成分为延胡索乙素、甲素等[6]，白芍主要止痛成分为芍药苷等[7]，这可能是本药起镇痛作用的主要成分。
创面愈合大体分为炎症期、增殖期、塑形期，临床中常根据伤口的不同时期、症状辨证论治，常用祛腐生肌、燥湿收脓、行气活血和酸涩收口等。中药外用促进创面愈合机制主要有抗感染、调节创面免疫功能、改善局部血液循环、改善局部肉芽组织营养等[8]。广痛消泡沫气雾剂中的延胡索等成分能活血利气止痛，可能是其促进愈合的原因，其机理有待进一步研究。
參考文献：
[1] 陈美婉，陈昕，潘昕，等.药用泡沫气雾剂的研究和应用概况[J].药学进展，2009，33（12）：551.
[2] 吴振宇，吴广均，赵宝明.广痛消泡沫气雾剂的止痛解痉作用[J].中国中药杂志，2001，26（8）：559.
[3] 曾南.药理与中药药理实验[M].北京：科学出版社，2008：132.
[4] 宋文阁，王春亭，傅志俭，等.实用临床疼痛学[M].郑州：河南科学技术出版社，2008：15.
[5] Cull-Candy S， Brickley S， Farrant M. NMDA receptor subunits：diversity， development and disease[J]. Curr Op Neurobiol，2001， 11（3）：327.
[6] 梅全喜.现代中药药理与临床应用手册[M].北京：中国中医药出版社， 2008：790.
[7] 王晓光，傅江南.常用中药药理研究与临床运用[M].北京：人民军医出版社，2006：409.
[8] 廖小波，朱涛，林嘉鑫.外用中药促进感染创面愈合的机理研究概况[J].中医学报，2010，25（5）：861.
（收稿日期：2011-10-19，编辑：华强）
关键词：广痛消泡沫气雾剂；扭体法；热板法；促进愈合；小鼠；大鼠
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2012.03.013
中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2012）03-0033-03
广痛消泡沫气雾剂为肛门外用止痛剂，止痛效果好、起效快、安全可靠。泡沫气雾剂具有黏弹性、持续缓慢渗透性和柔软舒适感[1]，是软膏、栓剂、灌肠剂等无法相比的。在相关药效学实验[2]基础上，我们对其制药工艺进行了改进，并对药效学实验进行重新设计，观察改进后的广痛消泡沫气雾剂的疗效。
1 实验材料
1.1 动物
清洁级ICR小鼠，体质量（20±2）g；清洁级SD大鼠，体质量（250±20）g，中国医学科学院动物中心提供，许可证编号：SCXK（京）2009-0007。购进后适应性喂养3 d。实验场所为北京中医药大学东直门医院实验室，环境温度（20±2）℃，相对湿度20%～30%。
1.2 試剂及药物
冰醋酸（北京化工厂，批号20090505）、强痛定注射液（天津金耀氨基酸有限公司，批号0808271）、水合氯醛（国药集团化学试剂有限公司，批号20081027）、乙醚（北京化工厂，批号20090707）均为分析纯；含1.055 6 g原药材/mL广痛消原液（北京中医药大学中药学院提供）、康复新液（四川攀西药业有限公司，批号101022）。用去离子水将强痛定和冰醋酸分别稀释成0.25%和0.6%；用去离子水配制10%水合氯醛。
1.3 仪器
恒温水浴箱（上海金工机电设备有限公司），电子天平（深圳怡华新电子有限公司），游标卡尺（上海量具刃具厂）， Panasonic FH1牌摄相机（松下电器产业株式会社），打孔器。
2 实验方法
2.1 镇痛作用研究
2.1.1 扭体法 取ICR小鼠60只，雌雄各半，随机分为正常组、模型组、强痛定组及广痛消大、中、小剂量组，每组10只。各给药组先予腹腔注射药物，0.5 h后再次腹腔注射0.6%冰醋酸10 mL/kg；正常组小鼠先予腹腔注射生理盐水，0.5 h后再腹腔注射生理盐水（与冰醋酸等量）；模型组先予腹腔注射生理盐水，0.5 h后再腹腔注射冰醋酸。观察末次给药后0.5 h内小鼠扭体（腹部凹陷，躯干后腿伸直，臀部高起）次数、扭体潜伏时间（给药后至出现第1次扭体的时间间隔，0.5 h内未扭体者，其潜伏时按0.5 h计算）。扭体反应抑制率（%）=（模型组扭体数均值-实验组扭体数均值）/模型组扭体数均值×100%。
2.1.2 热板法 参考文献[3]。恒温水浴箱调至（55.0±0.5）℃，500 mL烧杯的底部接触水面，加热后做热刺激，秒表记录雌性小鼠自投入烧杯至出现舔后足的时间，作为该鼠的痛阈值，小于10 s或大于30 s或跳跃者均弃之不用。筛选合格雌性小鼠50只，随机分成强痛定组、盐水组及广痛消大、中、小剂量组，每组10只。给药前1 h、给药后0.5 h后分别测定痛阈值，超过60 s无反应者，其痛阈值按60 s计算。痛阈提高百分率（%）=（给药后痛阈-给药前痛阈）/给药前痛阈×100%。
2.2 促进愈合疗效实验
2.2.1 分组、造模与给药 取SD大鼠36只，雌雄各半，随机分为广痛消组、盐水组、康复新组。第1日10%水合氯醛腹腔注射麻醉（3.3 mL/kg）后，在大鼠两耳根部连线后4.5 cm背部正中央处，将鼠毛剔净，用打孔器造一面积约20 mm×11 mm创面，深达筋膜，换药时用1 mL注射器将药液均匀喷洒在创面上，每日1次。每只大鼠单笼喂养，以免互相抓伤；每2 d更换一次垫料，以免污物感染伤口。
2.2.2 观察指标 观察第1、3、7、14日创面面积并计算愈合率：以游标卡尺做参照，相机拍摄创面。拍摄时采用麻醉方法使大鼠处于放松状态，以免牵拉伤口（造模当日水合氯醛麻醉，第3、7、14日乙醚吸入麻醉）；创面、卡尺位于同一平面；相机垂直拍摄。采用Image Pro Plus软件计算创面面积。创面愈合率（%）=（第1日创面面积-观察当日创面面积）/第1日创面面积×100%。愈合时间：完全愈合以创面完全上皮化为准。
3 统计学方法
采用SPSS12.0统计软件处理。所有数据以—x±s表示，采用方差分析，各组与空白组和阳性对照组的比较采用Dunnet-t检验。广痛消各剂量组间两两比较采用LSD-t检验；若方差不齐，则采用近似t检验。P<0.05为差异有统计学意义。 4 结果
4.1 广痛消泡沫气雾剂对小鼠的镇痛作用（见表1、表2）
4.2 广痛消泡沫气雾剂对大鼠创面的促愈合作用
第1日创面面积比较差异无统计学意义（P=0.642 6），显示3组基线资料均衡。第3、7日3组愈合率差异无统计学意义（P=0.953 6，P=0.799 0）。愈合时间及第14日3组愈合率差异有统计学意义（P=0.024 5，P=0.000 1），广痛消促进愈合作用明显，疗效与康复新液相当。见表3。
5 讨论
疼痛是伴随真实或潜在性组织损伤或根据这种损伤所描述的一种不愉快的感觉和情感体验[4]，其病理实质是伤害性刺激引起细胞损伤，使细胞内的化学物质释放出来，兴奋伤害感受器，通过传入神经将这种刺激转化为神经冲动，传入中枢神经而产生痛感觉和痛反应。目前常用的验证药物止痛疗效的方法有热板法和扭体法。扭体法是通过化学刺激物质引起深部炎性疼痛，使小鼠出现扭体反应，能反映药物对外周性疼痛的止痛效果[5]。热板法中动物舔后足被认为是经脊髓上中枢整合后的行为，反映药物的镇痛作用是否具有一定的中枢抑制作用。扭体实验中，广痛消大、中、小剂量组能延长小鼠的扭体潜伏时间，减少扭体次数，说明广痛消具有较强的外周镇痛作用；热板法实验中，广痛消大、中剂量组能显著提高小鼠的痛阈，表明广痛消具有明显的中枢镇痛作用。可见，广痛消的镇痛特点表现为外周镇痛和中枢镇痛作用的综合效应。
广痛消泡沫气雾剂由延胡索、白芍等中药提取有效成分制成。延胡索能活血利气止痛，白芍能柔肝缓急止痛，临床上常用于治疗各种疼痛性疾病。药理研究表明，延胡索主要止痛作用成分为延胡索乙素、甲素等[6]，白芍主要止痛成分为芍药苷等[7]，这可能是本药起镇痛作用的主要成分。
创面愈合大体分为炎症期、增殖期、塑形期，临床中常根据伤口的不同时期、症状辨证论治，常用祛腐生肌、燥湿收脓、行气活血和酸涩收口等。中药外用促进创面愈合机制主要有抗感染、调节创面免疫功能、改善局部血液循环、改善局部肉芽组织营养等[8]。广痛消泡沫气雾剂中的延胡索等成分能活血利气止痛，可能是其促进愈合的原因，其机理有待进一步研究。
參考文献：
[1] 陈美婉，陈昕，潘昕，等.药用泡沫气雾剂的研究和应用概况[J].药学进展，2009，33（12）：551.
[2] 吴振宇，吴广均，赵宝明.广痛消泡沫气雾剂的止痛解痉作用[J].中国中药杂志，2001，26（8）：559.
[3] 曾南.药理与中药药理实验[M].北京：科学出版社，2008：132.
[4] 宋文阁，王春亭，傅志俭，等.实用临床疼痛学[M].郑州：河南科学技术出版社，2008：15.
[5] Cull-Candy S， Brickley S， Farrant M. NMDA receptor subunits：diversity， development and disease[J]. Curr Op Neurobiol，2001， 11（3）：327.
[6] 梅全喜.现代中药药理与临床应用手册[M].北京：中国中医药出版社， 2008：790.
[7] 王晓光，傅江南.常用中药药理研究与临床运用[M].北京：人民军医出版社，2006：409.
[8] 廖小波，朱涛，林嘉鑫.外用中药促进感染创面愈合的机理研究概况[J].中医学报，2010，25（5）：861.
（收稿日期：2011-10-19，编辑：华强）