黄瓜脂氧合酶基因CsLOX2的原核表达载体的构建及表达分析

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以先前克隆到的黄瓜脂氧合酶基因CsLOX2全长的cDNA为模板,用含有特异性酶切位点的Yh1、Yh2为引物,通过PCR方法将黄瓜脂氧合酶基因CsLOX2的ORF区构建到大肠杆菌表达载体pGEX-4T-1上获得原核表达载体p4t-LOX2,将该表达载体p4t-LOX2转化到大肠杆菌菌株BL21(DE3)中,获得相应的重组工程菌。在IPTG诱导下,通过SDS-PAGE电泳,得到一条约115kD的融合蛋白条带,除去pGEX-4T-1自身诱导的约26kD大小的GST标签蛋白后,CsLOX2编码一个约89kD的蛋白
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