【摘 要】
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目的:探究巴马汀是否通过结合MYC原癌基因启动子区G-四链体干预结肠癌HCT116细胞的增殖及凋亡及其可能的分子机制.方法:采用荧光光谱分析巴马汀与MYC基因G-四链体的结合能力,采用圆二色谱分析巴马汀对MYC基因G-四链体构型的影响,采用分子对接预测二者的结合模式,采用荧光显微镜分析巴马汀分子在HCT116细胞中的定位,采用实时荧光定量聚合酶链式反应分析巴马汀对MYC基因转录的影响,采用蛋白免疫印迹法检测巴马汀对MYC蛋白表达的影响,进一步采用噻唑蓝比色法分析巴马汀对HCT116细胞活力的影响,采用流式
【机 构】
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首都医科大学附属北京世纪坛医院,北京100038;中国科学院生物物理研究所,北京100101
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目的:探究巴马汀是否通过结合MYC原癌基因启动子区G-四链体干预结肠癌HCT116细胞的增殖及凋亡及其可能的分子机制.方法:采用荧光光谱分析巴马汀与MYC基因G-四链体的结合能力,采用圆二色谱分析巴马汀对MYC基因G-四链体构型的影响,采用分子对接预测二者的结合模式,采用荧光显微镜分析巴马汀分子在HCT116细胞中的定位,采用实时荧光定量聚合酶链式反应分析巴马汀对MYC基因转录的影响,采用蛋白免疫印迹法检测巴马汀对MYC蛋白表达的影响,进一步采用噻唑蓝比色法分析巴马汀对HCT116细胞活力的影响,采用流式细胞术分析巴马汀对HCT116细胞凋亡的影响.结果:荧光光谱及分子对接研究表明巴马汀可能以堆积方式与MYC基因G-四链体结合,圆二色谱分析表明马汀能够维持MYC基因G-四链体的平行构型,荧光成像分析表明巴马汀分布于细胞核中且能够与G-四链体结合.此外,巴马汀抑制了MYC基因转录及MYC蛋白表达,抑制了HCT116细胞的增殖并促进了细胞凋亡.结论:巴马汀能够结合MYC基因G-四链体并抑制其基因转录,进而抑制MYC蛋白表达,这可能是巴马汀抑制结肠癌HCT116细胞增殖并促进其凋亡的分子机制之一.
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