131I-K237对人前列腺癌LNCaP细胞的凋亡诱导作用

• 作 者: 李娟 张瑜 赵倩 郭珺
• 机 构: 750004 银川，宁夏医科大学总医院核医学科,泸州医学院附属医院核医学科,750004 银川，宁夏医科大学总医院核医学科,青岛市立医院核医学科
• 出 处: 中华核医学与分子影像杂志
• 发表日期: 2014年34期
• 关键词: Prostatic neoplasms Tumor cells cultured Iodine radioisotopes Apoptosis

目的

鉴定¹³¹I-K237多肽(H-组氨酸-苏氨酸-蛋氨酸-酪氨酸-酪氨酸-组氨酸-组氨酸-酪氨酸-谷氨酰胺-组氨酸-组氨酸-亮氨酸-OH)在体外与人前列腺癌LNCaP细胞的亲和性和对其的凋亡诱导作用。

方法

应用Iodogen法对K237多肽进行¹³¹I标记，用TLC测定标记率及经Sephadex G25层析柱分离纯化后的¹³¹I-K237放化纯。于96孔板接种LNCaP细胞，分4组，每组设3个复孔：实验组加入15 kBq ¹³¹I-K237；阴性对照组加入Na¹³¹I，设5、10、15 kBq 3个亚组；竞争组加入K237(质量浓度分别为1、2、4、8、16 μg/μl)后加入15 kBq ¹³¹I-K237；空白对照组加入PBS。48 h后测定放射性计数并计算各组细胞结合率。在24孔板接种LNCaP细胞，分3组：¹³¹I-K237干预组分别加入5、10、15 kBq的¹³¹I-K237，K237干预组分别加入100 μl质量浓度为1、2、4 μg/μl的K237，空白对照组加100 μl PBS；温育48 h后，分别应用光学显微镜观察细胞形态变化，荧光显微镜鉴别凋亡细胞，再行核酸凝胶电泳，并以流式细胞术(FCM)检测LNCaP细胞的凋亡率。采用单因素方差分析和最小显著差异t检验比较数据差异。

结果

¹³¹I-K237标记率达(73.7±3.2)%，分离纯化后放化纯为(96.7±0.6)%。实验组、阴性对照3个亚组和空白对照组的LNCaP细胞结合率分别为(95.8±1.5)%、(8.2±0.4)%、(8.3±0.6)%、(8.6±0.5)%和0。竞争组实验结果显示，¹³¹I-K237与LNCaP细胞的结合率随未标记多肽K237量的增加而显著下降(t＝4.71, P<0.01)。LNCaP细胞经¹³¹I-K237干预后，光学显微镜和荧光显微镜下观察到凋亡细胞，DNA电泳可见明显的梯形条带。5、10、15 kBq ¹³¹I-K237组LNCaP细胞凋亡率分别为(34.1±2.9)%、(37.3±3.4)%、(41.7±3.6)%；质量浓度为1、2、4 μg/μl的未标记K237组凋亡率分别为(10.8±1.0)%、(12.5±2.1)%、(13.1±2.4)%；空白对照组中自然凋亡率为(2.9±0.3)%，差异有统计学意义(F＝76.31，P<0.05)；¹³¹I-K237组各亚组间差异有统计学意义(t＝3.09、3.27和4.52，均P<0.05)。

结论

¹³¹I-K237能与人前列腺癌LNCaP细胞特异性结合，对LNCaP细胞具有显著的凋亡诱导作用。