利用同框敲除技术研究Ⅲ型聚酮合酶基因orf18的代谢产物

• 作 者: 原海亮 管仁艳 何璟
• 机 构: 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室,华中农业大学理学院
• 出 处: 华中农业大学学报
• 发表日期: 2016年1期
• 关键词: 链霉菌 Ⅲ型聚酮合酶 同源双交换 同框敲除 基因回补 苯甲酸盐 Streptomyces sahachiroi type Ⅲ polyketide synth
• 基金项目: 国家自然科学基金项目（31270136）,教育部留学回国人员科研启动基金项目（[2009]1590）,教育部新世纪人才支持计划项目（NCETG08G0779）

为了阐明Streptomyces sahachiroi ATCC33158中Ⅲ型聚酮合酶基因orf18的功能,利用同源双交换的方法对该基因进行同框敲除,采用异位表达的方法进行了相应的回补实验.通过高效液相色谱及液相色谱G质谱联用分析发现基因orf18的敲除会明显降低发酵产物中苯甲酸盐的含量,回补该基因能够在一定程度上恢复苯甲酸盐的产量,表明orf18在原宿主中极有可能参与苯甲酸盐的生物合成.