蜜蜂主要变应原酸性磷酸酯酶基因的克隆及原核表达载体的构建

• 作 者: 张强 叶卫翔 刘志刚 陈思 罗新萍 黄钟
• 机 构: 深圳大学过敏反应与免疫学研究所,广东深圳,518060;深圳出入境检验检疫局食品检验检疫技术中心,广东深圳,518067;深圳大学医学院,广东深圳,518060
• 出 处: 中国病原生物学杂志
• 发表日期: 2010年6期
• 关键词: 蜜蜂 酸性磷酸酯酶基因 基因克隆 序列分析 原核表达载体

目的 克隆蜜蜂Apis cerana cerana主要变应原酸性磷酸酯酶(Api m3)基因,构建其原核表达载体.方法 根据已知序列设计带有酶切位点的特异性引物,以提取的蜜蜂总RNA为模板RT-PCR扩增目的 基因,并进行序列分析.将基因片段亚克隆到PET-28a表达载体上.结果 获得蜜蜂Api m3基因.构建了其原核表达载体.基因分析显示该基因全长1 167 bp,编码388个氨基酸,推测分子质量单位为45.279 9 ku,等电点为5.53.序列分析显示与Gen-Bank中已知基因的同源性为97%.结论 成功克隆蜜蜂Apim3基因并构建原核表达载体,对进一步进行变应原表达和免疫学活性鉴定有积极意义.