基于UHPLC-LTQ-Orbitrap MS分析不同炮制工艺对地黄化学成分的影响

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为探析炆地黄化学组分并比较不同炮制工艺对地黄化学成分的影响,采用超高效液相色谱-线性离子阱-静电场轨道阱质谱联用(UHPLC-LTQ-Orbitrap MS)技术识别地黄中的化学成分,根据相对分子质量和碎片离子等质谱信息,结合文献信息以及人类代谢组学数据库(human metabolome database, HMDB)鉴定化学成分,并以炮制前后各成分的离子峰面积比作为炮制前后的变化指数进行比较。利用SIMCA软件建立地黄不同炮制品的主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)模型,获得PCA图、OPLS-DA图和变量重要性投影(VIP)值,筛选地黄炮制前后的差异成分,并分析差异成分的含量随不同炮制方法的变化规律。该实验共鉴定出66个化学成分,生地黄57个成分,清蒸地黄55个成分,酒炖地黄55个成分,九蒸九晒地黄51个成分,传统糠炆地黄62个成分,电锅炆地黄63个成分,其中炆地黄的9个黄酮类成分由辅料陈皮引入。经PCA,发现不同炮制方法熟地黄的成分具有明显的差异,OPLS-DA筛选出VIP值>1的32个化学成分作为不同炮制方法的主要差异成分,其中9个成分为炆制地黄(传统糠炆、电锅炆)的特有成分,其他差异成分在九蒸九晒或炆制(传统糠炆、电锅炆)地黄的降解程度大于清蒸或酒炖。结果表明,地黄炮制前后化学种类和成分含量发生明显的变化,地黄苦苷元、地黄苷、jionoside D、野菰酸、橙皮苷、柚皮苷等32个成分是区分地黄不同炮制品的最重要化合物,辅料陈皮引入的黄酮类成分可能是炆地黄功效区别于其他炮制品的重要物质基础。
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