小鼠脾脏内皮祖细胞的分离和培养

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目的 探讨小鼠脾脏内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)的体外分离,定向分化和培养方法。方法 梯度密度离心法从小鼠脾脏中分离单个核细胞,用含血管内皮生长因子的M199培养液培养,每4d更换培养基去除非贴壁细胞,观察经过不同时间培养后的细胞形态、结构和功能变化。结果 培养4d可发现梭形贴壁细胞,7d后细胞成集落状,14d左右可观察到条索状、网状血管样结构,原代细胞培养21d左右接近融合并呈典型的鹅卵石样排列。培养7d透射电镜可见特征性的Weible-Palade小体存在
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