mBD1-mBD3融合基因真核表达载体构建及体外抗流感病毒初步研究

• 作 者: 冯艳 王月玲 李明远 江滟 李婉宜 杨远 王保宁 冯伟 张强
• 机 构: 四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室,贵阳医学院微生物学教研室
• 出 处: 西部医学
• 发表日期: 2009年7期
• 关键词: mBD1-mBD3 RT-PCR 真核表达 免疫荧光 重叠-PCR TCID50 Murine beta-defensin Eukaryotic express
• 基金项目: 基金项目：本课题由国家自然科学基金资助（No：30671964）

目的构建小鼠β防御素1和β-防御素3（mBD1，mBD3）融合基因的真核表达载体，研究mBD1-mBD3融合蛋白的抗流感病毒作用。方法通过RT-PCR和重建PCR方法构建mBD1-mBD3融合基因；经EcoRI和Xho工双酶切后插入相同酶切的pcDNA3．1（＋），构建成重组质粒pcDNA3．1（＋）／mBD1-mBD3，对重组质粒进行PCR、酶切和测序鉴定；将构建好的真核表达载体转染MDCK细胞，G418筛选稳定表达株，RT—PCR和免疫荧光染色法鉴定胞内mBDl-mBD3的表达。用流感病毒感染稳定表达