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目的建立超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)的各亚型CYP450酶探针底物定量分析方法,并用于药物对代谢酶活性影响的评价。方法采用超高效液相色谱仪-三重四极杆串联质谱仪,选用Waters HSS T3(1.8μm,10×2.1 mm)色谱柱,以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱。采用CYP450酶特异性探针药物法,根据FDA推荐选择7种特异性探针药物(CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2D6、CYP2E1和CYP3A4)进行测定。采用电喷雾离子源(ESI),在正离子扫描下,采用多反应检测模式(MRM)进行测定。采用体外共孵育法比较柴胡多炔对酶活性的抑制率。结果7种特异性探针底物可在6 min内准确测定;空白孵育基质中的内源性物质对待测物及内标的测定无干扰;待测物最低定量限最低达0.32μmol/L,线性良好,相关系数均>0.99;精密度≤14.1%,准确度≤11.2%;提取回收率和基质效应均符合分析要求。柴胡多炔(RB-2与RB-4)对CYP1A2有较微弱的抑制(底物减少率分别为38%和24%),而对其他代谢酶活性均无明显抑制作用。结论该方法分析时间短、专属性强、准确度好、精密度高、基质效应小,适用于7种代谢酶活性的测定。