【摘 要】
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目的探索炎症刺激下,骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)产生的外泌体对小鼠淋巴抗原6C高表达(Ly6Chigh)单核巨噬细胞和Ly6Clow两个亚群比例的影响。
【机 构】
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南方医科大学药学院; 广东省人民医院医学研究中心广东省医学科学院; 广州医科大学药学院分子临床药理学重点实验室;
【基金项目】
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国家自然科学基金重点项目(No 81330007,U1601227);广东省重大科技计划资助项目(No 2014A050503047,2015B020225006)
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目的探索炎症刺激下,骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)产生的外泌体对小鼠淋巴抗原6C高表达(Ly6Chigh)单核巨噬细胞和Ly6Clow两个亚群比例的影响。方法梯度离心法分离BMSCs,鉴定其形态、表面标记及成脂诱导分化能力。脂多糖处理BMSCs 48h,收集上清并提取外泌体,采用Western blot法、透射电镜以及粒径分析鉴定外泌体。磁珠分选小鼠腿骨中的单核巨噬细胞,与外泌体共培养24 h后,LPS刺激48 h,流式细胞术检测Ly6C亚群变化。ELISA检测细胞上清炎症因子的变化。结果 BMSCs表达CD44、CD90等,不表达CD34、CD45,并有成脂分化能力。外泌体表达CD63,粒径大小为(82.4±3.70)nm,LPS刺激下BMSCs产生较多的外泌体(P<0.01)。与LPS组相比,外泌体可以使Ly6Chigh单核细胞比例上升(P<0.01),Ly6Chigh巨噬细胞比例下降(P<0.05),且LPS刺激BMSCs产生的外泌体比正常BMSCs产生的外泌体的作用更加明显(P<0.05)。促炎因子IL-6水平也明显上调(P<0.05)。结论 BMSCs产生的外泌体可以改变Ly6Chigh单核巨噬细胞亚群比例,为BMSCs的临床治疗提供了新的靶点。
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