【摘 要】
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试验旨在优化硒蛋白W(selenoprotein W,SelW)的原核表达系统,并评估SelW的免疫原性和基于IgY抗体检测猪体内SelW的可行性。将获得的猪SelW基因序列密码子进行优化、合成并连
【机 构】
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新疆农业大学动物医学学院,安阳工学院现代生物技术研究所,西北农林科技大学动物医学院
【基金项目】
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乌鲁木齐市科技计划项目(P16130001),陕西省国际科技合作项目(2017KW-ZD-10),河南省高校科技创新人才支持计划(18HASTIT035),河南省高等学校重点科研项目应用研究计划(19B180001),安阳工学院博士启动金(BSJ2017002).
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试验旨在优化硒蛋白W(selenoprotein W,SelW)的原核表达系统,并评估SelW的免疫原性和基于IgY抗体检测猪体内SelW的可行性。将获得的猪SelW基因序列密码子进行优化、合成并连接至pET-32a(+)表达载体中,构建原核表达重组质粒pET32a(+)-SelW,转化E.coli BL21(DE3)宿主菌中,进行IPTG诱导表达,SDS-PAGE鉴定重组猪SelW的表达情况,并免疫产蛋鸡制备抗SelW的IgY多克隆抗体,通过间接ELISA检测IgY抗体滴度,采用Western blot
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