抗果蝇Trio蛋白抗体的制备及鉴定

• 作 者: 缪峰 吕雯雯 丁洁 袁榴娣
• 机 构: 东南大学发育与疾病相关基因教育部重点实验室
• 出 处: 东南大学学报：医学版
• 发表日期: 2008年4期
• 关键词: Trio基因 原核表达 抗体制备 trio gene prokaryotic expression antibody preparation
• 基金项目: 国家自然科学基金资助项目（30670444）.

目的：制备免抗果蝇Trio蛋白的抗体。方法：以RT-PCR扩增Trio的1173bp的基因片段并克隆入pET28a（＋）和pGEX-4T-1（His）6C表达载体中，表达并纯化Trio-His、Trio-GST融合蛋白。用纯化的Trio-His融合蛋白免疫家免产生抗Trio的抗体，用Trio-GST亲和层析法进行纯化并采用Western blot法检测抗体生物学活性。结果：表达的Trio-His蛋白以包涵体的形式存在，用His亲和层析法分离纯化后得到较纯的Trio-His融合蛋白，以纯化的Trio-His