【摘 要】
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10-23 DNA酶是能主动切割mRNA的一类反义寡核苷酸.利用10-23 DNA酶的直接切割作用验证mRNA结构靶点的有效性.对筛选的绿色荧光蛋白(GFP)基因mRNA的4个靶点平行设计了4条反义
【机 构】
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军事医学科学院放射医学研究所免疫学研究室,北京,100850北华大学医学院,吉林,132000;
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10-23 DNA酶是能主动切割mRNA的一类反义寡核苷酸.利用10-23 DNA酶的直接切割作用验证mRNA结构靶点的有效性.对筛选的绿色荧光蛋白(GFP)基因mRNA的4个靶点平行设计了4条反义寡核苷酸和4条10-23 DNA酶,对照组反义寡核苷酸将最佳靶点--靶点2的反义寡核苷酸突变2个碱基,对照组10-23 DNA酶将靶点2的10-23 DNA酶结合臂中央突变2个碱基.体外4条10-23 DNA酶切割mRNA的结果和相应的4条反义寡核苷酸依赖的RNase H降解结果完全相似,细胞内4条10-23 DNA酶对绿色荧光蛋白的表达抑制作用与相应的4条反义寡核苷酸相似,表明10-23 DNA酶显示的最佳作用靶点同样是最佳作用效果的反义寡核苷酸结合靶.10-23 DNA酶可以作为评价mRNA结构靶点有效性的新工具.
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