DHA对氧糖剥夺-复氧复糖损伤时小胶质细胞活化的影响

• 作 者: 冯燕 王魁 张霞婧 邵勇平 赵蔚
• 机 构: 西安市第四医院麻醉科 710001,西安交通大学第二附属医院麻醉科 710004,西安市第四医院麻醉科 710001,西安市第四医院麻醉科 710001,西安市第四医院麻醉科 710001,
• 出 处: 中华麻醉学杂志
• 发表日期: 2019年39期
• 关键词: 二十二碳六烯酸类 再灌注损伤 小神经胶质细胞

目的

评价二十二碳六烯酸(DHA)对氧糖剥夺-复氧复糖损伤时小胶质细胞活化的影响。

方法

将N9小胶质细胞以10⁴个/孔的密度接种于96孔细胞培养板培养3～5 d，采用随机数字表法分为3组(n＝18)：对照组(C组)、氧糖剥夺-复氧复糖组(OGD/R组)和DHA＋氧糖剥夺-复氧复糖组(DHA＋OGD/R组)。C组37 ℃培养箱(95%空气-5%CO₂)中培养24 h；OGD/R组和DHA组将培养基更换为无糖培养基，置于37 ℃培养箱(95%N₂-5%CO₂)中培养12 h，随后将培养基更换为正常培养基，37 ℃培养箱(95%空气-5%CO₂)中继续培养24 h，制备氧糖剥夺-复氧复糖损伤模型。DHA组于氧糖剥夺前12 h时加入25 μmol/L DHA孵育。采用MTT法测定细胞活力，采用化学比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)活性，采用免疫荧光染色法计数活化小胶质细胞，采用Western blot法检测小胶质细胞活化标志物iba-1表达水平，采用ELISA法检测培养基TNF-α、IL-6、IL-4和IL-10的浓度。

结果

与C组比较，OGD/R组和DHA＋OGD/R组细胞活力降低，LDH活性升高，活化小胶质细胞计数增多，iba-1表达上调，OGD/R组TNF-α和IL-6浓度升高，DHA＋OGD/R组TNF-α、IL-6、IL-4和IL-10浓度升高(P<0.05)；与OGD/R组比较，DHA组细胞活力升高，LDH活性降低，活化小胶质细胞计数减少，iba-1表达下调，TNF-α和IL-6浓度降低，IL-4和IL-10浓度升高(P<0.05)。

结论

DHA减轻氧糖剥夺-复氧复糖损伤的机制可能与抑制小胶质细胞活化，减轻炎症反应有关。