【摘 要】
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目的:建立胰岛素抵抗HepG2细胞模型,观察苦荞清蛋白酶解物(tartary buckwheat albumin hydrolysate,TBAH)对HepG2细胞胰岛素抵抗的影响.方法:采用碱性蛋白酶水解苦荞清蛋白制
【机 构】
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贵州医科大学基础医学院,生物化学与分子生物学教研室,贵州贵阳 550025;贵州医科大学公共卫生学院,贵州贵阳 550025
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目的:建立胰岛素抵抗HepG2细胞模型,观察苦荞清蛋白酶解物(tartary buckwheat albumin hydrolysate,TBAH)对HepG2细胞胰岛素抵抗的影响.方法:采用碱性蛋白酶水解苦荞清蛋白制备TBAH,超滤法截留分子质量小于3 kDa的TBAH;利用高糖高胰岛素诱导HepG2细胞36 h建立胰岛素抵抗模型,以2.5、5、10 μg/mL的TBAH培养细胞24 h.观察TBAH对HepG2细胞葡萄糖代谢的影响;检测细胞氧化损伤指标(一氧化氮(nitric oxide,NO)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和活性氧(reactive oxygen species,ROS))水平;Western blot检测胰岛素受体底物1(insulin receptor substrate 1,IRS-1)/磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信号通路中相关蛋白表达情况.结果:与IR模型组相比,TBAH组葡萄糖消耗量显著增多(P＜0.05),且呈剂量依赖性,同时MDA、NO和ROS水平显著降低(P＜0.01,P＜0.05),SOD活力显著升高(P＜0.05),LDH活力显著下降(P＜0.05);p-IRS-1蛋白表达水平显著降低(P＜0.05),磷酸化Akt、PI3K、葡萄糖转运蛋白4表达水平极显著上升(P＜0.01).结论:TBAH通过抑制氧化应激改善胰岛素抵抗.
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