粉防己碱对兔耳瘢痕增生组织Ⅰ、Ⅲ型胶原与TGF-β1基因表达的影响

来源 :中华整形外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:WUTEK2008
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目的 观察粉防己碱(tetrandrine,Tet)对兔耳瘢痕增生组织Ⅰ、Ⅲ型胶原和TGF-β1基因表达的影响,探讨粉防己碱抑制瘢痕增生的体内机制.方法 建立兔耳瘢痕模型,并分为生理盐水组、泼尼松龙组、低浓度Tet组(1.0 mg/ml)、高浓度Tet组(7.5 mg/ml),按分组给药.动态观察瘢痕形态学变化;HE和Masson染色分别观察成纤维细胞数量和胶原表达与排列;免疫组化观察Ⅰ、Ⅲ型胶原和TGF-β1表达情况;RT-PCR检测Ⅰ、Ⅲ型胶原和TGF-β1及Smad 3 mRNA表达.结果 ①伤后24 d创面完全表皮化,形成突出皮面、质地韧、暗红色增生样组织块;HE、Masson染色示:瘢痕增生样组织块成纤维细胞数量及胶原面密度均明显高于正常皮肤,且胶原排列紊乱呈漩涡和结节状.②形态学观察示,Tet组、泼尼松龙组与生理盐水组比较瘢痕充血程度降低、颜色变淡、质地变软、厚度变薄,其中高浓度Tet组改善最明显.③HE、Masson染色显示:粉防己碱组、泼尼松龙组较盐水组成纤维细胞数量明显减少(P<0.01),胶原面密度明显降低(P<0.01),排列稀疏整齐,未见漩涡与结节,其中高浓度组成纤维细胞和胶原面密度降低最明显.④免疫组化示:各组Ⅰ、Ⅲ型胶原及TGF-β1均阳性表达;生理盐水组、泼尼松龙组、低浓度Tet组、高浓度Tet组,Ⅰ、Ⅲ型胶原面密度TGF-β1阳性表达率依次降低(P<0.01);另外Ⅰ、Ⅲ型胶原面密度比值也呈下降趋势,从高到低依次为生理盐水组>低浓度Tet组>高浓度Tet组和泼尼松龙组.⑤RT-PCR检测示:各组瘢痕组织Ⅰ、Ⅲ型胶原和TGF-β1及信号分子Smad 3 mRNA扩增条带亮度有明显差异;与生理盐水组比较,Tet组、泼尼松龙组Ⅰ、Ⅲ型胶原和TGF-β1及Smad 3 mRNA表达减弱(P<0.01);高浓度Tet组对Ⅰ型胶原和TGF-β1及Smad 3 mRNA的表达减低最明显.结论 Tet能明显抑制兔耳瘢痕增生组织Ⅰ、Ⅲ型胶原和TGF-β1基因表达并抑制Smad 3 mRNA表达,可能是其抑制瘢痕增生的重要机制之一。

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