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目的：建立一支高灵敏度、高特异性、精确、简便的微板酶联夹心杂交技术，对人单核细胞分泌的TNF－αmRNA进行定量检测。方法：设计两条特异探针，其中一条为捕获探针，5’端带有氨基修饰，可以与微量DNA结合板表面的NOS基团共价结合，而且是“竖直”地包被在微孔内，另一个为检测探针，3'端带有生物素标记。提取人单个核细胞总RNA，RT－PCR后的扩增产物经变性后加入已包被好捕获探针的微孔板中，加入检测探针与已杂交的产物结合，最后加入亲和素一辣根过氧化物酶(Avidin-HRP)显色系统催化底物显色，45