一种高效表达和快速纯化重组人IL-10的原核载体系统

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目的 探讨一种在大肠杆菌中高效表达和简单纯化重组人白细胞介素10(IL-10)的方法。方法 构建重组人IL-10表达载体pBAD/Thio-TOPO-IL10,它编码1个Mr34700融合蛋白即硫氧还蛋白-IL10。含表达质粒pBAD/Thio-TOPO-IL10的工程菌经阿拉伯糖诱导、37℃培养,上述融合蛋白得到表达,表达产物经固化Ni^2+树脂亲和层析纯化,用肠激酶从融合蛋白中切下靶蛋白IL-10。结果 硫氧还蛋白-IL10融合蛋白在大肠杆菌中的表达效率达50%,并且可从细菌粗提物中一步纯化融合蛋白。
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