【摘 要】
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目的:以人类免疫缺陷病毒(HIV)调节蛋白Rev与Rev反应区(RRE)的高亲和性建立引导HIV感染细胞凋亡的结构.方法:用分子克隆技术合成含RRE和肿瘤坏死因子受体-1(TNF-R1)的Rev依赖
【机 构】
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上海同济大学附属同济医院皮肤科,Microbiology,Macfalane
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目的:以人类免疫缺陷病毒(HIV)调节蛋白Rev与Rev反应区(RRE)的高亲和性建立引导HIV感染细胞凋亡的结构.方法:用分子克隆技术合成含RRE和肿瘤坏死因子受体-1(TNF-R1)的Rev依赖性凋亡引导质粒,流式细胞仪检测质粒表达.结果:新质粒pDM128-TNF-R1(pT128)Hind Ⅲ内切有3.1、2.7、1.0和0.87kb片段;聚合酶链反应(PCR)法检测示TNF-R1的1 360 bp片段.DNA测序法确认其准确性.单纯Hu p60 TNF-R1在pDC302(pT60)转染Hela,TNF-R1表达可明显杀伤Hela(P＜0.01),Rev存在时,pT128也能表达TNF-R1杀伤Hela(P＜0.01),但不及pT60的作用(P＜0.01);无Rev时,pT128不表达TNF-R1,不杀伤Hela(P＞0.01).单纯Rev不杀伤Hela(P＞0.01).pT128与pRev共转,TNF-R1表达较pT60慢(P＜0.01),40 h后才接近单纯pT60.结论:新质粒具有Rev依赖性表达作用,进而引导Rev表达细胞凋亡.
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