【摘 要】
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目的:研究低浓度紫杉醇对卵巢癌SKOV3细胞有丝分裂状态及细胞凋亡的影响及相关机制。方法:将Aurora B siRNA转染至SKOV3细胞,同时设置空白对照组及阴性对照组,通过蛋白质印迹
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科,
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目的:研究低浓度紫杉醇对卵巢癌SKOV3细胞有丝分裂状态及细胞凋亡的影响及相关机制。方法:将Aurora B siRNA转染至SKOV3细胞,同时设置空白对照组及阴性对照组,通过蛋白质印迹法检测Aurora B蛋白表达。转染48 h后,用低浓度紫杉醇(100 nmol/L)处理各组细胞24 h,用流式细胞仪检测各组细胞有丝分裂指数的变化,通过免疫荧光染色观察各组细胞有丝分裂改变和细胞骨架形态改变。同时用100nmol/L紫杉醇处理各组细胞72 h,用流式细胞仪检测各组细胞凋亡。结果:将终浓度100 nmol/L Aurora B siRNA转染实验组SKOV3细胞后,Aurora B蛋白的表达相对于空白和阴性对照组明显下降,差异有统计学意义(P<0.01)。转染48 h后,使用低浓度紫杉醇(100 nmol/L)处理细胞24 h,相对于空白和阴性对照组,实验组有丝分裂指数明显下降,差异均有统计学意义(P<0.01)。通过分裂期标志蛋白p-H3对各组细胞进行免疫荧光检测,实验组的p-H3阳性细胞比例降低,与空白和阴性对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。通过细胞骨架蛋白α-tubulin对3组细胞进行免疫荧光染色检测,实验组出现圆形细胞骨架结构及浓缩核结构的细胞比例明显低于空白和阴性对照组,且差异均有统计学意义(P<0.01)。转染48 h后,采用低浓度紫杉醇(100 nmol/L)处理各组细胞72 h,与空白和阴性对照组相比,实验组细胞凋亡比例降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:Aurora B的表达下调可以降低低浓度紫杉醇对SKOV3细胞有丝分裂的阻滞作用,同时也可抑制低浓度紫杉醇诱导的卵巢癌细胞凋亡,可能是导致卵巢癌细胞对紫杉醇不敏感的关键分子机制之一。
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