大鼠PEDF基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定

• 作 者: 王正 董红燕 张中明 张昊 袁延亮 陈李李 石合现
• 机 构: 徐州医学院附属医院胸心外科,徐州医学院神经生物学研究中心
• 出 处: 徐州医学院学报
• 发表日期: 2011年2期
• 关键词: PEDF基因 RNA干扰 慢病毒载体 PEDF gene RNA interference lentivirus vector

目的 构建针对大鼠PEDF 基因的RNA干扰（RNAi）慢病毒表达载体并进行鉴定,探讨PEDF基因对缺血心肌血管新生的影响.方法 构建PEDF基因过表达质粒,测序鉴定.针对PEDF基因不同干扰靶点构建4种RNAi 病毒载体质粒pGCsi-U6/Neo/GFP/shRNA,测序鉴定.过表达质粒和RNAi质粒共转染293T细胞后应用Western blot方法进行外源筛靶确定PEDF基因RNAi 有效靶序列.有效RNAi 病毒质粒和其他3种辅助包装原件载体质粒通过Lipofectamine 2000共转染29