【摘 要】
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用5~6d的棉花无菌苗下胚轴切段与农杆菌共培,菌株质粒中Gus基因为标记基因,NPTⅡ基因为选择基因。在含0.1mg·L-12,4-D和0.1mg·L-1KT的MS培养基上共培48h,转移到添加头孢霉素500mg·L-1,卡那霉素50mg·L-1的MS培养基中诱导和筛选抗性愈伤
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用5~6d的棉花无菌苗下胚轴切段与农杆菌共培,菌株质粒中Gus基因为标记基因,NPTⅡ基因为选择基因。在含0.1mg·L-12,4-D和0.1mg·L-1KT的MS培养基上共培48h,转移到添加头孢霉素500mg·L-1,卡那霉素50mg·L-1的MS培养基中诱导和筛选抗性愈伤组织,70~80d时,进行GUS检测,选择GUS阳性愈伤组织,经体细胞分化生成转基因再生植株。
The hypocotyl cuttings of cotton aseptic seedlings with 5 ~ 6d were co-cultured with Agrobacterium. The Gus gene of the plasmid was a marker gene and the NPTⅡ gene was the selected gene. The cells were co-cultured on MS medium containing 0.1 mg · L-12, 4-D and 0.1 mg · L-1 KT for 48 h, and then transferred to cefotaxime 500 mg · L -1, kanamycin 50 mg · L- 1 of MS medium to induce and screen resistant callus, 70 ~ 80d, GUS detection, selection of GUS positive callus, by the somatic cell differentiation to generate transgenic plants.
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