粗皮桉ISSR—PCR反应体系优化

• 作 者: 陈升侃 项东云 邓紫宇 梁建新 蓝必布 李昌荣 梁机
• 机 构: 广西大学林学院,广西优良用材林资源培育重点实验室广西林科院,广西国有大桂山林场
• 出 处: 桉树科技
• 发表日期: 2015年1期
• 关键词: 粗皮桉 ISSR-PCR 体系优化 单因素试验 正交试验 Eucalyptus pellita ISSR-PCR single factor test orth

为建立粗皮桉ISSR-PCR优化反应体系，先通过单因素试验确定影响粗皮桉ISSR-PCR5个因素（Mg^2＋、dNTP、TaqDNA聚合酶、DNA模板、引物）的较适宜浓度范围，在此基础上进一步通过正交试验对5个因素4个水平进行优化，并用DPS软件分析试验结果。结果表明粗皮桉ISSR-PCR的优反应体系为：在25此反应体系中，10×PCR buffer2．5μL、MgCl2．0mmol·L^-1、dNTPs0．3mmol·L^-1、Taq DNA聚合酶1．25U、DNA模板60