【摘 要】
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目的 观察mTORC1和mTORC2在前列腺癌C4-2细胞中的作用.方法 噻唑蓝(MTY)比色法检测转染siRNA raptor和siRNA rictor后C4-2细胞增殖改变;流式细胞术(FCM)检测敲除mTORC1(rapto
【机 构】
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安徽医科大学第一附属医院泌尿外科,华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科
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目的 观察mTORC1和mTORC2在前列腺癌C4-2细胞中的作用.方法 噻唑蓝(MTY)比色法检测转染siRNA raptor和siRNA rictor后C4-2细胞增殖改变;流式细胞术(FCM)检测敲除mTORC1(raptor)和mTORC2(rictor)后C4-2细胞凋亡;Western blot检测siRNA raptor和siRNArictor后C4-2细胞雄激素受体(AR)和Akt磷酸化表达.结果 MTT显示敲除raptor生长抑制率无显著变化[(25.37±2.63)%比(27.49±2.96)%,P＞0.05],而敲除rictor组[(25.37±2.63)%比(62.86±5.61)%,P＜0.01]显著地抑制了细胞的生长;FCM显示敲除raptor显著增加了细胞凋亡[(11.76±1.45)%比(38.23±3.71)%,P＜0.01],而敲除rictor对C4-2细胞凋亡无显著性变化[(11.76±1.45)%比(14.25 ±1.68)%,P＞0.05];Western blot检测显示敲除mTORC1显著增加C4-2细胞AR[(0.21±0.04)%比(0.73 ±0.12)%,P＜0.01]和Akt磷酸化表达[(0.23±0.06)%比(0.68±0.11)%,P＜0.01],而敲除mTORC2显著地抑制了C4-2细胞AR[(0.21 ±0.04)%比(0.07 ±0.02)%,P＜0.01]和Akt磷酸化表达[(0.23±0.06)%比(0.06±0.03)%,P＜0.01].结论 mTORC2对前列腺癌C4-2细胞的存活是必须的,mTORC2是治疗前列腺癌有希望的靶目标.
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